为什么PCR中目的DNA片段数量x与循环轮次n的关系 x=2^n-2n
首先PCR技术扩增目的基因DNA扩增【约】为2的n此方,不是2n。这是因为目的基因的DNA受热后接旋成单链,引物再与单链件几乎不结合,并在DNA聚合酶作用下延伸,但其结合时的循环并不只有一个引物结合,所以所以是【约】为2n。
正向引物:5'-cttcgaaattc-3'
反向引物:5'-ccgatcgggaga-3‘ 正向引物与上游片段相同,反向引物与下游片段反向互补。
扩展资料:
PCR反应五要素:参加PCR反应的物质主要有五种即:引物(PCR引物为DNA片段,细胞内DNA复制的引物为一段RNA链)、酶、dNTP、模板和缓冲液(其中需要Mg2+)。
引物有多种设计方法,由PCR在实验中的目的决定,但基本原则相同。PCR所用的酶主要有两种来源:Taq和Pfu,分别来自两种不同的噬热菌。其中Taq扩增效率高但易发生错配。Pfu扩增效率弱但有纠错功能。所以实际使用时根据需要必须做不同的选择。
缓冲液的成分最为复杂,除水外一般包括四个有效成分:缓冲体系,一般使用HEPES或MOPS缓冲体系;一价阳离子,一般采用钾离子,但在特殊情况下也可使用铵根离子;二价阳离子,即镁离子,根据反应体系确定,除特殊情况外不需调整;辅助成分,常见的有DMSO、甘油等,主要用来保持酶的活性和帮助DNA解除缠绕结构。
参考资料来源:百度百科-聚合酶链式反应