Question

配制培养基过程中应该注意什么问题

Answer 1

1、为确认工作细胞库是否受到污染，病毒种子的工作种子批次是否受到污染，培养基及其添加成分（如小牛血清、NaHCO3等）是否受到污染，可通过细菌、真菌、支原体无菌试验确认和消除。同时，还应验证无菌试验介质的灵敏度。

实际生产中，可以从配制好的培养液中取少量加入营养琼脂于恒温培养箱内培养，48小时即可观察有无污染。

2、高压灭菌设备和过滤灭菌设备应进行验证，以确保灭菌灭菌效果；高压灭菌设备调试前后每6个月进行一次验证，每灭菌前后（灭菌后至少一次）进行验证。

3、有毒区域应严格与无毒区隔离，并应设置独立的空气净化系统和培养箱。毒性区应在无毒区保持相对负压，防止病毒污染培养细胞（特别是细胞库）。

4、在基本培养基中加入抗生素，野生型菌株被杀死，营养缺陷型不能在基本培养基中生长而被保留下来。

扩展资料：

配制培养基过程中的其它相关介绍：

培养基各成分完全溶解后，应进行pH的初步调正，因培养基在加热消毒过程中、pH会有所变化，例如，牛肉浸液约可降低pH0.2。而肠浸液pH却会有显著的升高。

因此，对这个步骤，操作者应随时注意探索经验、以期能掌握培养基的最终pH，保证培养基的质量。pH调正后，还应将培养基煮沸数分钟，以利培养基沉淀物的析出。

参考资料来源：百度百科-培养基

参考资料来源：百度百科-基本培养基