Question

利用甲基绿和吡罗红观察DNA和RNA在细胞中的分布的试验过程及注意事项

生物课要做这个实验，老师说这两种药品都很贵，学校买药品花了好几万，我们是第一批做这个试验的，老师以前也没做过，提前准备一下，嘻嘻

Answer 1

实验原理的分析
(1)染色：甲基绿和吡罗红两种染色剂对DNA和RNA的亲和力不同，甲基绿与DNA的亲和力强，吡罗红与RNA的亲和力强，即甲基绿+DNA一呈现绿色，吡罗红+RNA—呈现红色。利用甲基绿吡罗红混合染色剂对细胞染色，可显示DNA和RNA在细胞中的分布。
(2)水解：盐酸能够改变细胞膜的通透性，加速染色剂进入细胞，同时使染色质中的DNA与蛋白质分离，有利于DNA与染色剂结合。

1、实验原理的分析
(1)染色：甲基绿和吡罗红两种染色剂对DNA和RNA的亲和力不同，甲基绿与DNA的亲和力强，吡罗红与RNA的亲和力强，即甲基绿+DNA一呈现绿色，吡罗红+RNA—呈现红色。利用甲基绿吡罗红混合染色剂对细胞染色，可显示DNA和RNA在细胞中的分布。
(2)水解：盐酸能够改变细胞膜的通透性，加速染色剂进入细胞，同时使染色质中的DNA与蛋白质分离，有利于DNA与染色剂结合。
1、实验原理的分析
(1)染色：甲基绿和吡罗红两种染色剂对DNA和RNA的亲和力不同，甲基绿与DNA的亲和力强，吡罗红与RNA的亲和力强，即甲基绿+DNA一呈现绿色，吡罗红+RNA—呈现红色。利用甲基绿吡罗红混合染色剂对细胞染色，可显示DNA和RNA在细胞中的分布。
(2)水解：盐酸能够改变细胞膜的通透性，加速染色剂进入细胞，同时使染色质中的DNA与蛋白质分离，有利于DNA与染色剂结合。1.材料的选择
① 选用的实验材料既要容易获得，又要便于观察；
② 常用的观察材料由人的口腔上皮细胞、洋葱鳞片叶表皮细胞(为避免原有颜色的干扰，不可使用紫色表皮细胞)
2.取材要点
① 取口腔上皮细胞之前，应先漱口，以避免装片中出现太多的杂质；
② 取洋葱表皮细胞时，尽量避免材料上带有叶肉组织细胞。
3.冲洗载玻片时水的流速要尽量慢，切忌直接用水龙头冲洗。
4.安全要点
① 用酒精灯烘烤载玻片时，不要只集中于材料处，而应将载玻片在火焰上来回移动，使载玻片均匀受热，以免破裂；
② 烘烤后的载玻片不要马上放入盛有稀盐酸的烧杯中，最好先自然冷却1分钟。
5.换用高倍镜观察材料时，只能用细准焦螺旋进行调焦，切不可动粗准焦螺旋。

实验原理的分析
(1)染色：甲基绿和吡罗红两种染色剂对DNA和RNA的亲和力不同，甲基绿与DNA的亲和力强，吡罗红与RNA的亲和力强，即甲基绿+DNA一呈现绿色，吡罗红+RNA—呈现红色。利用甲基绿吡罗红混合染色剂对细胞染色，可显示DNA和RNA在细胞中的分布。
(2)水解：盐酸能够改变细胞膜的通透性，加速染色剂进入细胞，同时使染色质中的DNA与蛋白质分离，有利于DNA与染色剂结合。

Answer 2

一．实验目的：初步掌握观察DNA和RNA在细胞中分布的方法

二．实验原理：

1．甲基绿和吡罗红两种染色剂对DNA和RNA的亲和力不同，甲基绿使DNA呈现绿色，吡罗红使RNA呈现红色。利用甲基绿、吡罗红混合染色剂将细胞染色，可以显示DNA和RNA在细胞中的分布。

2．盐酸能够改变细胞膜的通透性，加速染色剂进入细胞，同时使染色休中的DNA和蛋白质分离，有利于DNA与染色剂结合。

三．方法步骤：

操作步骤
注意问题
解释

取口腔上皮细胞制片
载玻片要洁净，滴一滴质量分数为0.9%的NaCl溶液

用消毒牙签在自己漱净的口腔内侧壁上轻刮几下取细胞

将载玻片在酒精灯下烘干
防止污迹干扰观察效果

保持细胞原有形态

消毒为防止感染，漱口避免取材失败

固定装片

水解
将烘干的载玻片放入质量分数为8%的盐酸溶液中，用300C水浴保温5min
改变细胞膜的通透性，加速染色剂进入细胞，促进染色体的DNA与蛋白质分离而被染色

冲冼涂片
用蒸馏水的缓水流冲洗载玻片10S
洗去残留在外的盐酸

染色
滴2滴吡罗红甲绿染色剂于载玻片上染色5min

观察
先低倍镜观察，选择染色均匀、色泽浅的区域，移至视野中央，调节清晰后才换用高倍物镜观察
使观察效果最佳

Answer 3

注意事项�
1.材料的选择
① 选用的实验材料既要容易获得，又要便于观察；
② 常用的观察材料由人的口腔上皮细胞、洋葱鳞片叶表皮细胞(为避免原有颜色的干扰，不可使用紫色表皮细胞)
2.取材要点
① 取口腔上皮细胞之前，应先漱口，以避免装片中出现太多的杂质；
② 取洋葱表皮细胞时，尽量避免材料上带有叶肉组织细胞。
3.冲洗载玻片时水的流速要尽量慢，切忌直接用水龙头冲洗。�
4.安全要点�
① 用酒精灯烘烤载玻片时，不要只集中于材料处，而应将载玻片在火焰上来回移动，使载玻片均匀受热，以免破裂；
② 烘烤后的载玻片不要马上放入盛有稀盐酸的烧杯中，最好先自然冷却1分钟。
5.换用高倍镜观察材料时，只能用细准焦螺旋进行调焦，切不可动粗准焦螺旋。