Question

相比一代测序技术，二代测序技术具有哪些优点

Answer 1

相比一代测序技术，二代测序技术优点如下：

1、Illumina 原理：桥式PCR+4色荧光可逆终止+激光扫描成像
优势：Illumina的这种测序技术每次只添加一个dNTP的特点能够很好的地解决同聚物长度的准确测量问题，它的主要测序错误来源是碱基的替换。而读长短（200bp-500bp）也让其应用有所局限。
2、Roche 454：油包水PCR + 4种dNTP车轮大战 + 检测焦磷酸水解发光
优势：454技术优势测序读长较长，平均可达400bp。
3、Ion Torrent 原理：油包水PCR + 4种dNTP车轮大战 + 微电极PH检测
优势：Ion Torrent与454相比，主要差异在测序中，Ion Torrent不需要昂贵的物理成像设备，成本相对较低体积较小，同时操作更为简单，整个上机测序可在2-3.5小时内完成（文库构建时间除外）。

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Answer 2

第一代指双脱氧末端终止法，扩增后通过毛细管电泳读取序列，每次获取数据量少
第二代为高通量测序，采用微珠或高密度芯片边合成边测序，代表有454，solexa，solid，高通量，可一次获得数G数据，相对与第三代，都仍然需要扩增的方法放大信号，扩增后再检测。
第三代特点是单分子测序，多基于纳米科技，无需扩增，对单分链DNA/RNA直接用合成、降解、通过纳米孔等方式直接测序，核心特点是无需扩增所以成本更低