Question

cdna名词解释生物化学

Answer 1

cdna名词解释：由生物的某一特定器官或某发育时期所转录的全部mRNA经体外反转录形成的互补DNA片段。

cDNA是指互补DNA。特指在体外经过逆转录后与RNA互补的DNA链。与平常我们所称谓的基因组DNA不同，cDNA没有内含子而只有外显子的序列。真核生物的mRNA或其他RNA的cDNA，在遗传工程方面广为应用。

为具有与某mRNA（信使RNA）链呈互补的碱基序列的单链DNA即complementary DNA之缩写，或此DNA链与具有与之互补的碱基序列的DNA链所形成的DNA双链。

与RNA链互补的单链DNA，以其RNA为模板，在适当引物的存在下，由依赖RNA的DNA聚合酶（反转录酶）的作用而合成。

并且在合成单链cDNA后，在用碱处理除去与其对应的RNA以后，以单链cDNA为模板，由依赖DNA的DNA聚合酶或依赖RNA的DNA聚合酶的作用合成双链cDNA。真核生物的信使RNA或其他RNA的cDNA，在遗传工程方面广为应用。

在这种情况下，mRNA的cDNA，与原来基因的DNA（基因组DNA，genomic DNA）不同而无内含子；相反地对应于在原来基因中没有的而在mRNA存在的3’末端的多A序列等的核苷序列上，与exon序列、先导序列以及后续序列等一起反映出mRNA结构。

将cDNA重组到载体上合成的cDNA与载体DNA进行连接一般有3种方法：

①借助于末端转移酶的3’-OH端合成均聚物的能力，双链cDNA和线性化载体DNA的3’-OH端分别加上均聚核苷酸链。

②双链cDNA和线性化载体DNA分别用Klenow片段进行末端补平，然后用T4 DNA连接酶进行齐头连接，形成重组体。

③通过粘性末端连接。