Question

提的细菌DNA总是3条带是怎么回事

谢谢大家的热心相助。 我提的是细菌的全基因组DNA，电泳检测时，总是出现3条带。方法如下，请高人指点····
1。取1.5ml 细菌液体培养物于灭菌EP管中，12000rpm，离心1min，弃去上清液，收集菌体，如果菌体较少可再重复此操作。
2． 加400ul 裂解液（40mM Tris-醋酸，pH7.8，20mM 醋酸钠，1mM EDTA, 1%SDS）。用微量吸管快速吹打，使其混匀。
3． 加200ul 5M NaCl, 混匀后，12000rpm，离心15分钟，此步骤可重复2次去糖。
4． 将上清液移至另一灭菌EP管中，加入等体积的苯酚：氯仿：异戊醇（25：24：1），温和颠倒混合，12000rpm，离心3min，转移上清液，重复抽提。
5． 加入2倍体积的无水乙醇或异丙醇，离心5分钟，沉淀DNA，静止15分钟，用70%乙醇洗沉淀块2-3次，室温静止晾干。加入50ul TE缓冲液重新悬浮DNA，于-4℃下保存备用。

Answer 1

说明你提出的DNA不纯，存在三种DNA的空间状态。

琼脂糖电泳进行鉴定质粒DNA时，多数情况下你能看到三条带，但千万不要认为你看到的是超螺旋、线性和开环这三条带。

碱法抽提得到质粒样品中不含线性DNA，不信的话你用EcoRI来线性化质粒后再进行琼脂糖电泳，就会看到线性质粒DNA的位置与这三条带的位置不一样。

其实这三条带以电泳速度的快慢而排序，分别是超螺旋、开环和复制中间体（即没有复制完全的两个质粒连在了一起）。

如果你不小心在溶液II加入后过度振荡，会有第四条带，这条带泳动得较慢，远离这三条带，是20-100kb的大肠杆菌基因组DNA的片断。

Answer 2

细菌DNA总是3条带?考虑其中含有的质粒吧.

一般提取质粒DNA会出现三条带.

告诉你的提取方法 我帮你判断一下

Answer 3

分析原因：
1.如果提的是基因组，那么极有可能是基因组被打断了，提的时候要一定轻柔，这点超级注意，像对女孩子一样。
2.如果提的是质粒，那么它本身就是3条带，因为有3种形式的，超螺旋，线性和开环。
3.最后一种可能是提出来的东西很混乱。