Question

请问用PCR技术获得目的基因的大致步骤是什么？

Answer 1

首先，我们来说一下pcr技术所用的酶。所用的酶是taq
dna聚合酶，现在已知的所有的dna聚合酶在使单个的脱氧核苷酸聚合的时候都有一个共性，它无法从头开始，只能在一段序列的末尾续接。在生物体内dna自行复制的时候也是如此，只不过那个引物是生物体内rna聚合酶合成的一段rna，在pcr的时候引物是人们合成的一段dna。pcr技术大致有三步：第一步94°c使dna变性，双链变单链；第二步65°c退火；第三步72°c延伸
依次循环。taq
dna聚合酶是从极端微生物体内提取的，可以耐受高温，所以用它。说到引物，就可以说说一些在引物上做文章的技术。定点突变技术，在pcr的时候把引物的某一个核苷酸换成需要的突变核苷酸，pcr之后的产物就是在人为突变引物的后面续接而成的，就可以得到突变的目的dna。这里只是举一个典型例子，具体的在你今后学《分子生物学》和《生物化学》会逐步学到。