Question

质粒构建、提取详细步骤？

详细一点，谢谢

Answer 1

构建载体就是把目标DNA、载体、DNA连接酶、酶的buffer放到一起，然后4度连接过夜就行了。上面各个东西的用量，你可以参考连接酶的说明书。如果你是想连T载体的话，就可以直接拿PCR产物和载体连，如果是想做表达载体的话，你还要把目标DNA和载体进行酶切回收后，才能连。

质粒提取的方法一般用碱提法，去网上搜下，有很多的。或者买试剂盒提（试剂盒大部分也是碱提法的）。