Question

下列是基因工程的有关问题，请回答：（1）限制性核酸内切酶可以识别双链DNA分子中的特定核苷酸序列，并可

下列是基因工程的有关问题，请回答：（1）限制性核酸内切酶可以识别双链DNA分子中的特定核苷酸序列，并可以使每条链中特定部位的两个核苷酸之间的______（填化学键名称）断裂，形成的末端总体可分为两种类型，分别是______．（2）目的基因和运载体重组时需要的工具酶是______，和限制性核酸内切酶相比，它对所重组的DNA两端碱基序列______（有或无）专一性要求．（3）图1表示构建表达载体时的某种质粒与目的基因．已知限制酶Ⅰ的识别序列和切点是-G↓CATCC-，限制酶Ⅱ的识别序列和切点是一↓GATC-．分析可知，最好选择限制酶______切割质粒，限制酶______切割目的基因所在的DNA，这样做的好处分别是______、______．（4）人的肤色正常与白化病受常染色体上基因A和a控制．若白化病基因与相对应的正常基因相比，白化病基因缺失了一个限制酶的切点，甲、乙、丙3人白化基因或相对应正常基因的核酸分子杂交诊断结果如图2．由图2可以判断出，乙和丙的基因型分别是______、______．如果甲与丙婚配，后代患病的概率为______．

Answer 1

（1）限制性核酸内切酶（限制酶）能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性．经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端．
（2）目的基因和运载体重组时需要DNA连接酶连接两个核苷酸之间的磷酸二酯键．它对所重组的DNA两端碱基序列无专一性．
（3）图1中显示，已知限制酶Ⅰ的识别序列和切点是-G↓CATCC-，酶Ⅰ切割质粒不会把两个标记基因都破坏，最好选择限制酶I切割质粒．限制酶Ⅱ的识别序列和切点是一↓GATC-，目的基因两端均有酶Ⅱ的识别序列，限制酶II切割目的基因所在的DNA．
（4）由图2可以判断出，甲、乙和丙的基因型分别是Aa、AA、aa．如果甲与丙婚配，后代患病的概率为

1

2

故答案为：
（1）磷酸二酯键   粘性末端和平末端
 （2）DNA连接酶  无
（3）酶Ⅰ酶Ⅱ酶Ⅰ切割质粒不会把两个标记基因都破坏     目的基因两端均有酶Ⅱ的识别序列
（4）AA   aa   1/2

Answer 2