Question

什么是荧光素酶基因和绿色荧光蛋白基因？

Answer 1

荧光素酶是生物体内催化荧光素或脂肪醛氧化发光的一类酶的总称。由于荧光素酶检测简便、灵敏、快速，因此目前荧光素酶基因在基因工程方面已成为广泛使用的报告基因，具有检测灵敏度高，没有信号背景，并且不损害植物的优点。

来自维多利亚水母的绿色荧光蛋白（green：fluorescent：protein，GFP）是一种由238个氨基酸残基组成的单体蛋白，分子量27ku。它的特点是无需额外添加任何底物、酶、辅助因子等物质，也没有种属、组织和位置特异性，该基因是目前惟一在细胞内稳定表达且检测简单，结果真实可靠的新型报告基因，只要暴露于395nm的远紫外光或490nm的蓝光下便可受激而发出绿色荧光（508nm）。

通过突变与重新合成，将水母的密码子换成植物偏爱的密码子，GFP基因在植物中的表达效率与稳定性提高。而且，含此修饰GFP基因的转基因植物不仅形态正常，而且完全可育。

Answer 2

荧光素酶基因是指以荧光素(Luciferin)为底物来检测荧光素酶(Luciferase)活性的一种报告系统。绿色荧光蛋白基因是指经一定波长的激发光照射后，能量以光的形式释放的一种蛋白。二者的区别是荧光素酶依靠分解底物发光，需要用酶标仪检测发光值，线性范围广，灵敏度高，可以准确定量，是双荧光素酶报告基因检测的关键；绿色荧光蛋白基因依靠自身结构发光，荧光亮度非线性，不够灵敏，所以只能定性，不能定量。