Question

革兰染色原理步骤和结果意义

Answer 1

革兰氏染色（GramStaining）是用于辨别病菌的一种方式：这类染色法运用细菌细胞壁上的微生物物理性质不一样，可将病菌分为两大类，即革兰氏阳性（GramPositive）与革兰氏阳性菌呈阴性（GramNegative）。这一上色方式由荷兰医师汉斯·布拉德·革兰于1884年所创造发明，最开始是用于辨别肺炎链球菌与克雷白氏肺炎菌中间的关联，后营销推广为辨别细菌种类的关键特点之一，对由病菌感染造成的病症的疾病诊断及医治拥有普遍主要用途。革兰氏染色结果是如何的呢？
一、基本原理
根据结晶紫初染和碘液媒染后，在植物细胞内产生了不溶解水的结晶紫与碘的一氧化氮合酶，革兰氏阳性菌因为其植物细胞偏厚、肽聚糖网层级较多且化学交联高密度，故遇酒精或甲苯褪色解决时，因缺水反倒使网眼变小，再再加它没有脂质，故酒精解决不容易出现间隙，因而可以把结晶紫与碘一氧化氮合酶紧紧留到壁内，使其仍呈蓝紫色；而革兰氏阳性菌阴性菌因其植物细胞薄、外膜层脂质成分高、肽聚糖层薄且化学交联度差，在遇脱色剂后，以脂质主导的外膜快速融解，薄而疏松的肽聚糖网不可以阻拦结晶紫与碘一氧化氮合酶的总混，因而根据酒精褪色后仍呈没有颜色，再经过沙黄等鲜红色染剂复染，就使革兰氏阳性菌阴性菌呈鲜红色[1]。
上色的差别主要是阴性与阳性细菌细胞壁的差别所造成的。
血压革兰氏阳性病菌的植物细胞
G细菌细胞壁具备偏厚（20-80nm）而高密度的肽聚糖层，高达50层，占细胞壁成分的40%～95%，它同细胞质的表层紧密相连（图2-9）。有的G细菌细胞壁中带有磷壁酸（teichoic-acid），也称胞壁质（murein），它是凡士林和核糖醇的高聚物，磷壁酸一般以糖或碳水化合物的酯而存有。因为磷壁酸带负电，它在体细胞表面调整正离子浓度值。磷壁酸与细胞生长相关，细胞生长中有自溶素（autolysins）酶类起功效，磷壁酸对自溶有着调整作用，阻拦胞壁过多溶解和壁溶。
假如植物细胞的肽聚糖层被消溶，G体细胞变成原生质体（protoplasts），植物细胞荡然无存，而只留存细胞质。除链球菌感染外，大部分G细菌细胞壁中含非常少蛋白。
血液革兰氏阳性菌呈阴性病菌的植物细胞G—细菌细胞壁比G细菌细胞壁薄（15～20nm）而构造较繁杂，格外膜（outermembrane）和肽聚糖层（2～3nm）（图2-10）。在植物细胞和细胞质膜中间有一个显著的室内空间，称之为壁膜空隙（periplasmicspace）。
外膜G—细菌细胞壁外膜的基本成份是脂多糖（lipopolysaccharide,LPS），它同细胞质膜相似之处也是两层脂质，但除不饱和脂肪酸外还带有含糖量和蛋白。
LPS的含糖量一部分包含关键含糖量和O-特异含糖量。O-特异含糖量由反复支系的碳水化合物化合物分子结构构成，带有已糖（葡萄糖、半乳糖和鼠李糖）和二脱氨已糖。因为糖的种类不一样，使各种各样G—体细胞具备不一样特点的LPS。关键含糖量（corepolysaccharide）的关键成分是酮脱氨心酸（ketodeoxyoctonate,KDO）。
外膜中还带有几类蛋白质，如蛋白、透亮蛋白质。一些蛋白质具备埋孔功效（porin），管控外部分子结构进到体细胞；有的蛋白质分子结构能够做为噬菌体的蛋白激酶；很多G—病菌对高微生物有高致病是由LPS的成份决策的，它的毒副作用成分常称之为毒素累积（endotoxins）。