Question

为什么用限制酶切割目的基因时候需要使用两种以上不同的限制酶进行切割？

为什么用限制酶切割目的基因时候需要使用两种以上不同的限制酶进行切割？教辅上写着需要用两种以上，原因是一种的话会发生环化，可两种的话切后不也可以连接回去吗？

Answer 1

为了防止目的基因和运载体自身环化。为保证目的基因正序插入运载体，防止反向连接。

限制性核酸内切酶是可以识别并附着特定的脱氧核苷酸序列，并对每条链中特定部位的两个脱氧核糖核苷酸之间的磷酸二酯键进行切割的一类酶。

扩展资料：

限制作用实际就是限制酶降解外源DNA ，维护宿主遗传稳定的保护机制。甲基化是常见的修饰作用，可使腺嘌呤A和胞嘧啶C甲基化而受到保护。通过甲基化作用达到识别自身遗传物质和外来遗传物质的目的。

与第一型限制酶类似，同时具有修饰及识别切割的作用。可识别短的不对称序列，切割位与识别序列约距24-26个碱基对。

为有效的切割DNA，必须同时考虑DNA甲基化和限制酶对该类型甲基化的敏感性。另外，大部分商业限制酶如今专门用于切割甲基化DNA。

Answer 2

这个问题好，两种当然不会环化了，注意每种酶切后，的“切口”都不一样啊！
对你有益请采纳！

追问

同种酶的切口不是应该一样吗？还是意思是 一种酶切一端 两端分别用两种酶？

追答

对两边用不同的

Answer 3

为了防止目的基因和运载体自身环化。
为保证目的基因正序插入运载体，防止反向连接。

Answer 4

是怕切下来的片段自己环化

追问

教辅上这么写的我知道，可为什么会发生环化，不是应该和原来一样连接回去吗

追答

这都是有几率的

不知道你有没有学过化学反应进行的原理

都差不多的

两种酶让几率更小了而已