Question

单细胞培养的方法有哪些？各有什么特点？

Answer 1

1.转瓶培养
这个比较老的工艺，在逐步淘汰，不过投资少，技术含量低，人员经少量培训就可以操作。
2.悬浮培养
非贴壁依赖性细胞的一种培养方式。
细胞悬浮于培养基中生长或维持。某些贴壁依赖性细胞经过适应和选择也可用此方法培养。增加悬浮培养规模相对比较简单，只要增加体积就可以子。深度超过5mm，需要搅动培养基，超过10cm，还需要深层通入CO2和空气，以保证足够的气体交换。
通过振荡或转动装置使细胞始终处于分散悬浮于培养液内的培养方法。
利用固体琼脂培养基对植物的离体组织进行培养的方法在植物遗传实验中已经得到广泛的应用。但这种方法在某些方面还存在一些缺点，比如在培养过程中，植物的愈伤组织在生长过程中的营养成分、植物组织产生的代谢物质呈现一个梯度分布，而且琼脂本身也有一些不明的物质成分可能对培养物产生影响，从而导致植物组织生长发育过程中代谢的改变而利用液体培养基则可以克服这一缺点，当植物的组织在液体培养基中生长时，我们可以通过薄层震荡培养或向培养基中通气用以改善培养基中氧气的供应。植物细胞的悬浮培养是指将植物细胞或较小的细胞团悬浮在液体培养基中进行培养，在培养过程中能够保持良好的分散状态。这些小的细胞聚合体通常来自植物的愈伤组织。
一般的操作过程是把未分化的愈伤组织转移到液体培养基中进行培养。在培养过程中不断进行旋转震荡，一般可用100～120 r/min 的速度进行。由于液体培养基的旋转和震荡，使得愈伤组织上分裂的细胞不断游离下来。在液体培养基中的培养物是混杂的，既有游离的单个细胞，也有较大的细胞团块，还有接种物的死细胞残渣。
在液体悬浮培养过程中应注意及时进行细胞继代培养，因为当培养物生长到一定时期将进入分裂的静止期。对于多数悬浮培养物来说，细胞在培养到第18～25d 时达到最大的密度，此时应进行第一次继代培养。在继代培养时，应将较大的细胞团块和接种物残渣除去。若从植物器官或组织开始建立细胞悬浮培养体系，就包括愈伤组织的诱导、继代培养、单细胞分离和悬浮培养。目前这项技术已经广泛应用于细胞的形态、生理、遗传、凋亡等研究工作，特别是为基因工程在植物细胞水平上的操作提供了理想的材料和途径。经过转化的植物细胞再经过诱导分化形成植株，即可获得携带有目标基因的个体。

Answer 2

不知道你想要得到什么样的答案，一般利用细胞可以产生一些抗生素还有一些抗体，还有人类所需要的一些激素。

Answer 3

单细胞培养常见模型：
①在培养碟中原位单细胞微吸吮捕获、沉积分选培养模型
传统的荧光活化细胞分选方法（FACS）采用流式细胞术用来分选细胞，是分子基础分选中普遍使用的方法。这种方法只能检测具有荧光活性的细胞，不但细胞存活率低、纯度低，而且极易破坏细胞组织。
　　微吸吮单细胞分选培养模型是与倒置显微镜配合使用的，用于细胞筛选、提取、沉积的。
◇ 可直接从培养皿中进行细胞分选
◇ 分离粘结活细胞的细胞亚群，分离荧光或者冷光标记
◇ 无标记的和荧光的细胞都可通过软件进行自动识别
◇ 可确保细胞分离后活力，并且可培养
◇ 分选荧光分子探针标记的特定细胞
◇ 单细胞收集进行进一步培养、克隆，RNA 或者蛋白质制备
◇ 免疫制备，进行目标细胞分类
◇ 可对各种粘结细胞进行分类
◇ 细胞筛选前的细胞培养
◇ 一般的分选过程只需几分钟就可完成
◇ 使用安装在显微镜上的荧光滤片可实现多通道监测
◇ 分选速度为1Cell/秒每一个循环可筛选1~1000个细胞
②单细胞培养分析跟踪板模型
③使用把显微镜升级改造为纳米激光镊捕获操纵单细胞模型
这种模型很简单，在已有显微镜上加上纳米激光器或芯片就可以了
④使用活态单细胞激光拉曼光谱无损测定鉴别模型
活态单细胞激光拉曼光谱无损测定鉴别模式可在无任何标记情况下对活细胞进行三维扫描测定
其分子分布，更具优越性。活态单细胞激光拉曼光谱无损测定鉴别模式为医师，药师和生物学家
提供了利用拉曼光谱的便利的方式，不仅可以识别各种基团，还可以对化合物进行高精确度分析，
且对活细胞不需要使用生化标记物，荧光标记物或者抗体，对活细胞绝对安全。