实验中提取的DNA浓度太低,有办法浓缩
一.固体
聚乙二醇(PEG)浓缩:用透析袋外敷PEG至合适量。
二.丁醇抽提浓缩:DNA溶液中水可分配到
正丁醇或仲丁醇,但DNA不会。因此重复几次可显著减少DNA体积。
三.乙醇或
异丙醇沉淀:(1)需要
阳离子盐的存在,NaAc最常用,NaCl对含SDS样品好,NH4Ac去除dNTP好。PiCl沉淀RNA好,但不能用于反转录前。(2)沉淀温度与时间;0℃一4℃,12000g,10分钟,小于100bp
DNA需超速离心。
四.精胺沉淀法:与DNA结合后使DNA结构凝缩沉淀,需在无盐或低盐溶液。