何为正相色谱及反相色谱?在应用上有何特点?
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正相色谱基本上可以看作液固吸附色谱。其柱填料为吸附剂,表面有活性吸附点。溶剂和溶质分子可以吸附在活性中心。反相色谱是流动相极性大于固定相极性的色谱。
反相色谱的应用特点:反相介质性能稳定。分离效率高,它能分离蛋白质、肽、氨基酸、核酸、甾体、脂类、脂肪酸、碳水化合物、生物碱等含有非极性基团的物质。
正相色谱法的应用特点:全多孔型的微球型或无定型硅胶,然而,球形硅胶更适合于有效分离。用球形硅胶填充的正相柱具有较好的渗透性、较低的操作压力和较好的稳定性。
扩展资料:
反相色谱中最常用的有机溶剂有甲醇和乙腈。此外,乙醇、四氢呋喃、异丙醇和二氧六环等常用作改性剂。有机溶剂的梯度也会影响分辨率。梯度越小,分辨率越大。
正相色谱的保留机理类似于吸附过程。极性样品分子和溶剂分子吸附在柱填料表面的极性基团(吸附剂)上。对于常用于正相的氰基、氨基或二醇基固定相柱,吸附中心通常为键合配体或硅烷。在使用硅胶时,吸附位点为硅烷醇(一SiOH)。
参考资料来源:百度百科-反相色谱
参考资料来源:百度百科-正相色谱
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正相色谱基本上可以被看做是液固吸附色谱,其柱填料是吸附剂,其表面上分布有活性吸附位点,溶剂和溶质分子均能被吸附于活性位点上。由于相互作用力有大有小,溶剂分子与溶质分子、溶质分子相互之间又存在竞争吸附,从而造成了在柱内保留时间的差异,使不同物...
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