Question

如何分析高效液相色谱图

Answer 1

色谱图，其实简单地讲，是一个横坐标是时间，纵坐标是电信号的二维图谱。
高效液相色谱法，你可以简单地想象，固定相是一个多空海绵状的柱形结构，样品在孔洞中进进出出。因为各个物质的吸附能力不同，所以才会在色谱图中拉开距离。
和实验相关的参数：
1、保留时间-也就是可以定性的数据参数
如果使用同样的色谱柱，同样的流动相，分析同样的样品，那么这个样品的保留时间，应该是固定的。不同保留时间的色谱峰，应该表现出的是不同的物质。如果你跑的是反相色谱，那么色谱峰越靠后，它对应物质的极性也就越小。
2、峰面积-也就是可以定量的数据参数
这是你在色谱图中可以读出来的参数，在同一个色谱条件下，同一个物质的浓度和峰面积是成正比的。也就是说，如果你配制1.0mg/ml的X物质，进样后峰面积是10000，那么，你配制0.5mg/ml的X物质，进样后峰面积差不多就是5000
3、波长-这个是可以顺利进行试验的前提条件
同一样品，同一方法，同一色谱柱，在不同波长的峰面积是不同的。一个物质指在某些特殊波长下有吸收。比如一个物质在210nm和254nm处有吸收。那么波长在280nm处可能无法检出该物质。所以一个实验方法开始时要进行波长扫描。