什么是EGFP?
EGFP,即增强绿色荧光蛋白(Enhanced Green Fluorescent Protein),GFP,即绿色荧光蛋白(Green fluorescent protein)。
EGFP是GFP突变系,应用较多的是GFP的突变体:增强型绿色荧光蛋白(EGFP )(64位苯丙一亮),发射出的荧光强度比GFP大6倍以上。
绿色荧光蛋白,是一个由约238个氨基酸组成的蛋白质,从蓝光到紫外线都能使其激发,发出绿色荧光。虽然许多其他海洋生物也有类似的绿色荧光蛋白,但传统上,绿色荧光蛋白(GFP)指首先从维多利亚多管发光水母中分离的蛋白质。
绿色荧光蛋白结构
野生型绿色荧光蛋白,最开始是238 个氨基酸的肽链,约25KDa。然后按一定规则,11条β-折叠在外周围成圆柱状的栅栏;圆柱中,α-螺旋把发色团固定在几乎正中心处。发色图被围在中心,能避免偶极化的水分子、顺磁化的氧分子或者顺反异构作用与发色团,致使荧光猝灭。
荧光是荧光蛋白最特别的特点,而其中的发色团起着主要的作用。在α-螺旋上的65、66、67位氨基酸-丝氨酸、酪氨酸、甘氨酸经过环化、脱氢等作用后形成发色团。发色团形成过程是由外周栅栏上的残基催化,底物只需要氧气。
这暗示绿色荧光蛋白被广泛用于不同物种的潜力:在不同物种中能独立表达成有功能的蛋白,而不需要额外的因子。不过,现在依然在讨论准确的过程。
发色团上的共轭π键能吸收激发光能量,在很短的时间后,以波长更长的发射光释放能量,形成荧光。
以上内容参考:百度百科-绿色荧光蛋白、百度百科-EGFP
2024-12-11 广告