Question

磁珠法提取基因组DNA的一般步骤有哪些

Answer 1

购买BIOG的核酸提取试剂盒就有说明书的，现在操作很方便了，磁珠法提取基因DNA要看实验用的样本是什么的。

Answer 2

请自行准备：无水乙醇、异丙醇、1.5mL离心管，生理盐水。

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取出洗涤液，按70%比例加入无水乙醇，如6mL加入14 mL无水乙醇，12mL加入28 mL无水乙醇，混匀。

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取10-20mg左右的组织，用液氮研磨为粉末，转入1.5mL 离心管内，加入100 μL 生理盐水，振荡15秒 （或直接在100 μL 生理盐水中将组织匀浆为细胞悬液），加入200 μL 裂解液， 20 μL 复合消化液，充分混匀，56℃温育12分钟（如组织匀浆不充分，可适当延长消化时间至组织完全消化）。                                          

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冷却到室温，加入300μL异丙醇，充分混匀，再加入20μL磁珠复合液（每次使用前须充分混匀），振荡混匀3min（注意不要颠倒混匀，以防磁珠粘附于管盖内壁），静置2min。

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将离心管置于磁力架上放置约20s至磁珠完全吸附，开盖，彻底吸弃上清液（注意枪头不要接触磁珠）。

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加入800μL配制后的洗涤液，将离心管从磁力架上取下，充分振荡2min，确保磁珠完全分散。将离心管置于磁力架上放置约20s至磁珠完全吸附，开盖，彻底吸弃上清液（注意枪头不要接触磁珠）。

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将离心管从磁力架上取下，开盖，干燥约3-5min，至无明显乙醇气味。

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加入50-100 μL洗脱液，振荡至磁珠充分散开，室温静置2min，再振荡混匀1min。

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将离心管置于磁力架上，待磁珠完全吸附后，小心吸取上清液至一新的1.5mL离心管中，提取的核酸可直接用于下游实验，或-20℃保存备用。

Answer 3

裂解-结合-洗涤-洗脱

Answer 4

自动化吗？我一般用的是试剂盒提取。