Question

光学显微镜下观察的物体必须什么而且什么

Answer 1

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Answer 2

光学显微镜下观察的物体必须薄而透明，厚薄均匀的。

显微镜成像是利用光学原理，必须使可见光线穿过被观察的物体，如果不透光就不能在视野中成像．所以，在光学显微镜下观察的生物材料必须是薄而透明的，这是因为光线能透过材料。光线依次要通过反光镜、光圈、通光孔、玻片标本、物镜、镜筒、目镜，才能进入到人的眼睛。

在显微镜学中，“分辨率”一词用于阐述显微镜对细节进行区分的能力。换言之，这是样本内两个能被观察人员或者显微镜摄像头区分的实体点之间的最小距离。

显微镜的分辨率本质上与光学元件的数值孔径（NA）以及用于观察样本标本的光波长有关。此外，我们必须考虑Ernst Abbe于1873年首次提出的阿贝极限。

显微镜使用的是凸透镜，按照经典几何光学理论，凸透镜能将入射光聚焦到它的焦点上，但由于透镜口径有一定大小，光线透过时会由于波动特性会发生衍射，无法将光线聚成无限小的焦点上，而只会形成一定能量分布的光斑。

中央是明亮的圆斑，周围有一组较弱的明暗相间的同心环状条纹，把其中以第一暗环为界限的中央亮斑称为艾里斑（airy disk）。

由于衍射现象是不可避免的，所以如果我们在光学显微镜下观察样本，会看到艾里斑(Airy Disk)的存在。艾里斑是点光源通过透镜系统后产生的环状嵌套的光斑。

如果两个样本点相距过近，产生的艾里斑就会重叠导致无法分辨，从此产生了衍射极限这一概念。衍射极限也决定了显微镜的分辨极限。