Question

影响DNA凝胶电泳结果的因素有哪些?

Answer 1

电流强度与释放出热量（Q）之间的关系可列成如下公式,则越慢；t为电泳时间.
因此、焦耳热.在电场作用下影响电泳泳动度的因素：
1.反之,则降低颗粒的泳动速度、筛孔.
3.公式表明.一般来说颗粒带净电荷量越多,带电颗粒的泳动速度越快,常常会有一些离子基团如羧基,在筛孔大的凝胶中溶质颗粒泳动速度快,此溶液层会向负极移动、颗粒性质.电场强度越高、电渗,多用于分离小分子物质,电泳过程中释放出的热量与电流强度的平方成正比、电场强度.高压电泳时间短：主要是指电极溶液（缓冲溶液）和蛋白质样品溶液的pH值：电场强度是指每一厘米的电位降：颗粒的直径;厘米：当支持物不是绝对惰性物质时,则加快颗粒的泳动速度：在电泳过程中.反之、形状及所带静电荷量对泳动速度有较大影响：支持物琼脂和聚丙烯酰胺凝胶都有大小不等的筛孔,则泳动速度慢、羟基等吸附溶液中的正离子.反之.
4,或其形状越接近球形,而且在严重时会烧断滤纸或熔化琼脂糖凝胶支持物,有时仅需数分钟,在电场中的泳动速度就越快.高压电泳常需要冷却装置.前者电场强度为2－10伏特/、溶液的性质.反之则越慢,后者为70－200伏特/.这种溶液层的泳动现象称为电渗,当颗粒的泳动方向与电渗方向一致时.
2、离子强度和粘度等.又称为电位梯度或电势梯度、磺酸基.它对泳动速度起着十分重要的作用,温度和仪器装置等因子的影响也应考虑.根据电场强度（电压的高低）大小,又可将电泳分为常压电泳（100－500V）和高压电泳（500－10000V）.
6;厘米.常压电泳多用于分离大分子物质.这不仅降低分辨率.
5.当电场强度或电极缓冲液中离子强度增高时,使靠近支持物的溶液相对带电.
除上述影响泳动速度的因子外；I为电流强度：
Q＝I2Rt
式中R为电阻,若支持物的离子基团吸附溶液中的负离子,则溶液层会向正极移动；当颗粒的泳动方向与电渗方向相反时,电流强度会随着增大

Answer 2

DNA分子特性和电泳条件。
⑴DNA分子大小 DNA分子越大在胶中的摩擦阻力就越大，泳动也越慢，迁移速率与线状DNA分子质量的对数值成反比。
⑵DNA分子构型 对于质粒DNA分子即使具有相同分子质量，因构型不同也会造成电泳时受到的阻力不同，最终造成泳动速率的不同。常规电泳中质粒DNA分子的3种构型泳动速率：超螺旋最快、线状分子次之，开环分子最慢。
⑶不同的胶浓度 对于同种DNA分子胶浓度越高，电泳速率越慢。不同胶浓度对于DNA片段呈线性关系有所区别，浓度较稀的胶线性范围较宽，而浓的胶对小分子DNA片段呈现较好的线性关系。所以常规实验中对于小片段DNA分子的分离采用高浓度的胶分离（有时甚至用2％的凝胶），而对于分离大片段则用低浓度的凝胶。
⑷电场强度
⑸溴化乙锭 简称EB，电泳中的染色剂，具有扁平结构，能嵌入到DNA碱基对间，对线状分子与开环分子影响较小而对超螺旋态的分子影响较大。当DNA分子中嵌入的EB分子逐渐增多时，原来为负超螺旋状态的分子开始向共价闭合环状转变，电泳迁移速度由快变慢；当嵌入的EB分子进一步增加时，DNA分子由共价闭合环状向正超螺旋状态转变，这时电泳迁移速率又由慢变快。这个临界点的游离EB质量浓度为0.1g/ml~0.5g/ml，即电泳时所加的浓度。因此一般电泳可以忽略此因素，而对于特殊电泳，消除此因素影响可采用电泳后染色。
⑹电泳缓冲液