Question

解离漂洗染色制片步骤

Answer 1

解离漂洗染色制片步骤如下：

1、取材：课前，将洋葱放在装满水的广口瓶上，底部接触水，装置放在温暖环境中，待根长至1-5cm。注意培养基应经常换水，目的是防止烂根（乙醇发酵）。在上午10点——下午2点左右（分生区细胞分裂旺盛），切取其根尖（带有分生区）2-3mm。

    

2、解离：解离液为盐酸，时间为10——15min

目的是使组织细胞相互分离开。

（细胞壁由纤维素和果胶构成）

解离时间过长，染色体被破坏。

解离时间过短，组织细胞解离不充分，不能相互分离。

此时通过解离已将细胞杀死，使细胞停留在不同的分裂时期，不会再发生变化而保持原来形态。由于看不到细胞的动态变化，故不可移动装片在视野周围寻找细胞的不同分裂期。

3、漂洗：漂洗液为水，时间为10min

目的是洗去盐酸以防解离过度和便于染色。

     

4、染色：染色液为龙胆紫或醋酸洋红溶液（pH<7，但为有色阳离子碱性染料）

目的是使染色体着色。

染色时间过长——太深，无法观察。

染色时间过短——太浅，不易观察。

5、制片：染色结束后盖上盖玻片，用拇指轻压盖玻片使细胞分散开。

   

6、观察：先低倍镜观察——找到根尖分生区。

再高倍镜观察——找到各时期的细胞。