Question

关于植物组培中MS培养基,激素BA,NAA的疑问

Answer 1

关于植物组培中MS培养基，激素BA和NAA的问题，您可以参考如下信息：
1. MS培养基：是一种常用的植物组织培养基，其中包含多种营养成分，如大量元素、微量元素、有机物等，可以满足植物细胞生长和分裂的基本需求。
2. 6-BA：是一种细胞分裂素，能够促进细胞分裂和扩大，并诱导芽的形成。在植物组织培养中，通常用于诱导愈伤组织形成和细胞分裂。
3. NAA：是一种生长素，能够促进细胞的生长和分化，并诱导根的形成的。在植物组织培养中，通常用于诱导根的形成和调控植物的生长发育。
根据您提供的信息，以下是对于植物组培中使用激素BA和NAA的具体建议：
1. 在配制MS培养基时，通常会添加一定量的BA和NAA。具体的激素浓度和配比需要根据不同的植物种类和培养目标进行调整。一般来说，BA和NAA的浓度范围在0.1-1.0毫克/升之间。
2. 在使用6-BA时，需要注意其浓度和使用时间。浓度过高可能会引起细胞分裂过度和异常分化，浓度过低则无法诱导细胞分裂和芽的形成。建议根据具体的植物种类和培养目标进行试验，选择合适的浓度和使用时间。
3. 在使用NAA时，需要注意其浓度和使用时间。浓度过高可能会引起细胞生长过度和根的过度分化，浓度过低则无法诱导根的形成。建议根据具体的植物种类和培养目标进行试验，选择合适的浓度和使用时间。
4. 在植物组织培养过程中，除了激素外，还需要注意培养基的pH值、温度、光照等因素。这些因素对于细胞的生长和分化都有重要影响，需要根据具体的植物种类和培养目标进行调控。
总之，在使用激素BA和NAA时，需要根据具体的植物种类和培养目标进行选择和控制。同时，还需要注意其他培养因素的调控，以确保植物组织培养的成功进行。

Answer 2

1 MS培养基的配制包括以下步骤.
培养基母液的配制和保存 MS培养基含有近30种营养成分,为了避免每次配制培养基都要对这几十种成分进行称量,可将培养基中的各种成分,按原量的20倍或200倍分别称量,配成浓缩液,这种浓缩液叫做培养基母液.这样每次使用时,取其总量的1/20（50 mL）或1/200（5 mL）,加水稀释,制成培养液.现将制备培养基母液所需的各类物质的量列出,供配制时使用.
大量元素(母液Ⅰ) mg／L
NH4NO3 33 000
KNO3 38 000
CaCl2·2H2O 8 800
MgSO4·7H2O 7 400
KH2PO4 3 400
微量元素(母液Ⅱ)
KI 166
H3BO3 1 240
MnSO4·4H2O 4 460
ZnSO4·7H2O 1 720
Na2MoO4·2H2O 50
CuSO4·5H2O 5
CoCl2·6H2O 5
铁盐(母液Ⅲ)
FeSO4·7H2O 5 560
Na2-EDTA·2H2O 7 460
有机成分(母液Ⅳ)
ⅣA
肌醇 20 000
ⅣB
烟酸 100
盐酸吡哆醇(维生素B6) 100
盐酸硫胺素(维生素B1) 100
甘氨酸 400
以上各种营养成分的用量,除了母液Ⅰ为20倍浓缩液外,其余的均为200倍浓缩液.
上述几种母液都要单独配成1 L的贮备液.其中,母液Ⅰ、母液Ⅱ及母液Ⅳ的配制方法是：每种母液中的几种成分称量完毕后,分别用少量的蒸馏水彻底溶解,然后再将它们混溶,最后定容到1 L.
母液Ⅲ的配制方法是：将称好的FeSO4·7H2O和Na2-EDTA·2H2O分别放到450 mL蒸馏水中,边加热边不断搅拌使它们溶解,然后将两种溶液混合,并将pH调至5.5,最后定容到1 L,保存在棕色玻璃瓶中.
各种母液配完后,分别用玻璃瓶贮存,并且贴上标签,注明母液号、配制倍数、日期等,保存在冰箱的冷藏室中.
MS培养基中还需要加入2,4-二氯苯氧乙酸（2,4-D）、萘乙酸（NAA）、6-苄基嘌呤（6BA）等植物生长调节物质,并且分别配成母液（0.1 mg/mL）.其配制方法是：分别称取这3种物质各10 mg,将2,4-D和NAA用少量（1 mL）无水乙醇预溶,将6BA用少量（1 mL）的物质的量浓度为0.1 mol/L的NaOH溶液溶解,溶解过程需要水浴加热,最后分别定容至100 mL,即得质量浓度为0.1 mg/mL的母液.
配制培养液 用量筒或移液管从各种母液中分别取出所需的用量：母液Ⅰ为50 mL,母液Ⅱ、Ⅲ、ⅣA和ⅣB各5 mL.再取2,4-D 5 mL、NAA 1 mL,与各种母液一起放入烧杯中.
配制培养液时应注意：①在使用提前配制的母液时,应在量取各种母液之前,轻轻摇动盛放母液的瓶子,如果发现瓶中有沉淀、悬浮物或被微生物污染,应立即淘汰这种母液,重新进行配制；②用量筒或移液管量取培养基母液之前,必须用所量取的母液将量筒或移液管润洗2次；③量取母液时,最好将各种母液按将要量取的顺序写在纸上,量取1种,划掉1种,以免出错.
溶化琼脂 用粗天平分别称取琼脂9 g、蒸糖30 g,放入1 000 mL的搪瓷量杯中,再加入蒸馏水750 mL,用电炉加热,边加热边用玻璃棒搅拌,直到液体呈半透明状.然后再将配好的混合培养液加入到煮沸的琼脂中,最后加蒸馏水定容至1 000 mL,搅拌均匀.
调pH 用滴管吸取物质的量浓度为1 mol/L的NaOH溶液,逐滴滴入溶化的培养基中,边滴边搅拌,并随时用精密的pH试纸（5.7.0）测培养基的pH,一直到培养基的pH为5.8为止（培养基的pH必须严格控制在5.8）.
2 BA为细胞分裂素 NAA 是萘乙酸,为生长素的一种
3 适于百合根的激素暂时没找到
以下是叶片和胚的激素：对麝香百合 (LiliumlongiflorumThunb)叶片进行离体培养 ,可成功获得无菌苗.试验结果表明 :培养基MS +BA 0 1mg/L +NAA 1 0mg/L适于初代培养 ,有助于根和芽的分化 ;MS +BA 0 5mg/L +NAA1 5mg/L适于增殖培养 ,利于愈伤组织的产生 ,并促进芽的分化 ;生根培养基为 1/ 2MS +NAA 1 0mg/L +多效唑 10 0mg/L ;当试管苗根长 1cm时移栽易成活
在含有1 mg/ L IAA,1 m g/ L GA3,6 0 0 m g/ L CH的 MS培养基上培养 ,蔗糖含量为 6 8%时 ,百合幼胚胚性生长最好 ,培养 30 d后可以得到正常胚 .在含有 0 .1 m g/ L NAA,1 m g/ L BA的 MS培养基上可以形成淡绿色的愈伤组织 ,将这些愈伤组织转移到 1 / 2 MS无激素的培养基上培养可以形成大量的不定芽 ,不定芽生根移栽后 ,其成活率可达90 %以上