RNA电泳条带中的 28s 18s 5s分别代表RNA电泳中核糖体RNA的大小。
Northern blot中最为常用的电泳胶是含有甲醛的琼脂糖凝胶，甲醛可以减少RNA的二级结构，电泳完成后的胶可经过EB染色后在紫外下检测RNA的质量。
对小分子的RNA 或者microRNA一般采用聚丙烯酰胺变性胶电泳。RNA电泳中可以依据核糖体RNA的大小大致判断条带的大小，28S RNA大小一般为5kb，18S RNA 大小一般为2kb。28S RNA 的亮度一般是18S 的两倍。
扩展资料
Northern blot 的优势在于它可检测目的片段的大小、是否具有可变剪切出现、可允许探针的部分不配对性，杂交过后的膜经过一定的处理除去探针后还可保存很长时间再次杂交使用。
Northern blot中探针的序列需要和检测目的基因序列互补配对，探针可以是DNA、RNA或者其它的寡聚核苷酸，但最小的长度必须大于25bp，体外合成的RNA探针可以采用更高的退火温度来减少背景中的噪音。
探针一般采用P或者地高辛来进行标记。杂交过后，可采用X胶片显色的方法来检测信号。
参考资料来源：百度百科-northern blot
研载生物科技（上海）有限公司_
2023-04-12 广告
分别代表核糖体RNA的大小。
S为沉降系数，当用超速离心测定一个粒子的沉淀速度时，此速度与粒子的大小直径成比例，可间接反映分子量的大小。
真核生物有4种rRNA，它们分子大小分别是5S、5.8S、18S和28S。
RNA电泳中可以依据核糖体RNA的大小大致判断条带的大小，RNA电泳条带上，应是28S在上，18S在下，且亮度为28S是18S的两倍。
扩展资料
Northern blot首先通过电泳的方法将不同的RNA分子依据其分子量大小加以区分，然后通过与特定基因互补配对的探针杂交来检测目的片段。Northern blot在1977年由斯坦福大学James Alwine，David Kemp和George Stark发明。
可用来检测不同组织、器官，生物体不同发育阶段以及胁迫环境或病理条件下特定基因的表达样式。
如northern blot被大量用于检测癌细胞中原癌基因表达量的升高及抑癌基因表达量的下降，器官移植过程中由于免疫排斥反应造成某些基因表达量的上升。Northern blot还可用来检测目的基因是否具有可变剪切产物或者重复序列。
Northern blot的优势在于它可检测目的片段的大小、是否具有可变剪切出现、可允许探针的部分不配对性，杂交过后的膜经过一定的处理除去探针后还可保存很长时间再次杂交使用。
参考资料来源：百度百科--northern blot
参考资料来源：百度百科--核糖体RNA
S代表沉降系数，当用超速离心测定一个粒子的沉降速度是，此速度与粒子的大小直接成比例。5S、18S、28S分别具有120、1900和4700个核苷酸。
S是沉降系数。
|
广告 您可能关注的内容 |
