求安捷伦1260液相色谱 工作站的详细操作方法
一、开机：
1、打开电脑；
2、打开液相色谱各个模块的电源；
3、双击桌面“LC1260(Online)”，进入联机界面；
二、排气：
1、手动旋开泵处冲洗阀（逆时针旋转约1圈）
2、右键单击“Pump”图标区域，选择“Method”选项，进入泵编辑画面，设流雹哗速：5ml/min，点击“确定”；
3、右键单击“Pump” 图标区域，点击“Control”选项，选中“ON”，点击“确定”，则系统开始冲洗，直到
管线内（由溶剂瓶到泵入口）无气泡为止（一般为5分钟），切换通道继续冲洗，直到所有要用通道
无气泡为止；
4、右键单击“Pump” 图标，点击“Method”选项，设流速：0ml/min，手动旋紧冲洗阀；
5、右键单击“Pump”图标，点击“Method”选项，按照方法要求选择合适比例的流动相，设流速：1.0ml/min；（不一定是1）；
6、同理右键单击“Column Comp”，“DAD”图标，点击“Method”选项，按照；
7、方法的要求设置温度，波长，点击“控制” 选项，“ON”打开柱温箱和检测器；
三、编辑方法：
1、点击“Method”—— “Edit EntireMethod”开始编辑完整方法；
2、选中除“Data Analysis ”外的三项，进入下一选项卡，选择“Als”（自动进样），点击“OK”，进入下一选项；
3、选择“Method”菜单下“Method Information”选项，在“Method Comments”中加入方法的信息（如：
This is for test!），选择“OK”，进入下一选项；
4、泵参数设定：右键单击“Pump”图标，点击“Method…”选项，设置“Flow”：如1.0ml/min；“Stop
Time”：如10 min（该停止时间仅为做一个样品需要的时间），按照要求选择合适比例的流动相配
比，选择“OK”，进入下一选项；
5、自动进样器参数设定：右键单击“Sampler”图标，点击“Method”选项，选择“Injection volume”，输
入进样体积，选择“OK”，进入下一选项；
6、柱温箱参数设定：右键单击“Column Comp”，点击“Method”选项，设置“Left”温度（可设置温度范
围：低于室温10℃-80℃），一般“Left”和“Right”温度一致，选择“Combined”绑定即可，“Stop
Time”选择“As Pump /Injector”，选择“OK”，进入下一选项；
7、UV检测器参数设定: 右击“DAD” ，点击“Method…”选项，下方的空白处输入所需的检测波长（可
根据需要选择多个波长，最多可选8个波长）；“Stop Time”选择“As Pump /Injector”；“Spectrum”
——“Store”选项下，根据需要选择 “None”或“All（全波长扫描）”等选项，选择“OK”，进入下一选
项；
8、编辑方法完毕，从“Method”菜单中，选中“Save Method As”，输入一方法名，选择“OK”，保存方
法成功。
9、单针进样
10、从“Run Control”菜单中，选择“Sample Information”选项，输入“Operator Name”；在“Data File”中
选择“Path”和 “Prefix/Counter（文件命名）”设置“Prefix（一般设置为年月日）”和“Counter”；输
入“Location（样品位含散置）”和“Sample Name”，选择“OK”，进入下一选项；
11、基线平稳后选择“Run Control”中的“Run Method”选项，开始进样。
四、序列进样：
1、选择“Sequence”菜单下“ Sequence Table”选项，在“Confiqure Table”中选择需要选项，一般
为“Vial(样品瓶)”，“Sample Name(样品名称)”，“Method Name(方法名称)”，“Inj/Vial（进样次
数）”，“Sample Type（样品类型）”，“Datafile（文件名）”和“Inj Volume（进样体积）”；
2、点击“Inset”生成一行，设置上述参数，选中该行，点击“Copy”和“Paste”复制后修改相应参数，即
生成序列表，选择“OK”，进入下一选项；
3、点击“Sequence”谈肆氏菜单下“ Sequence Parameters”选项，选择序列数据的“Path”（序列会自动生成
以“序列名称－时间”为名称的文件夹保存数据），数据建议选择 “Prefix/Counter”保存；
在“Shutdown”选项下选中“Post-Sequence Command/Macro”，根据需要选择“PUMPALL OFF（序列
结束后关闭泵）”” “LAMPALL OFF（序列结束后关闭紫外灯）”” “STANDBY（序列结束后关闭紫外灯
和泵）”，选择“OK”，进入下一选项；（注：若“Path”中默认保存于C盘，则可点击“View”，选
择“Preferences”，根据需要添加相应的“SequenceTemplates”“Data”“Master Methods”保存路径）
4、从“Sequence”菜单，选中“Save Sequence Template As”，输入一序列名，选择“OK”，即可；
5、基线平稳后选择“Run Control”中的“Run Sequence”选项，开始序列进样。
（注：若中途停止运行，则选择“Run Control”中的“Stop Run/Inject/ Sequence”可保留图谱信息，若选
择Abort，则所有图谱信息都丢失）
五、数据分析（脱机状态使用）：
1、双击“LC1260（Offline）”图标进入的脱机画面
2、从“View”菜单中，点击“Data Analysis”进入数据分析画面
3、从“File”菜单选择“Load Signal”，选中所需的数据文件名，点击“OK”，则数据被调出。
4、谱图优化：从“Graphics”菜单中选择“Signal Options”。从“范围” 中选择“Full”或“Use Ranges” 选择
所需“Time Range”和“Response Range”，选择“OK”；从“Integration”中选择“Integration Events”，调
整“Area Reject”和“Height Reject”删除杂峰；点击“Set Integration”图标，可选择性消除不需要的积
分，若想消除该操作，则选择“Method Manual Events”上排左起第5个图标进行移除操作即可，点击
左边“√”图标，将积分参数存入方法并退出“Integration Events”。
（注：“Set Integration”图标为）
六、标准曲线绘制：
1、选择“Calibration”菜单下“New Calibration Table”，选择“Automatic Setup”中“Level（即标曲中对应
的点，第一个点即为1）”和“Defanlt Amount（标准品对应点的浓度）”，选择“OK”；
2、通过选择“Calibration”菜单下的“Add Level”选项依次添加各点参数，若为外标法，在“ISTD”项下
选“NO”，若为内标法则选“Yes”；“#”项下对应标准品和内标无的数字的应统一；若想更改标准曲线中
的对应点；
3、选择“Calibration”菜单下的“Recalibrate”项的“Mode”选项，选择“Average”则表示取当前点与标曲
中对应点的平均值替代标曲中原对应点，若选择“Replace”则表示将当前点取代标曲中对应点；
（注：修改“Defanlt Amount”中浓度单位的方法：选择“Calibration”项下“Calibration Setting”，修
改“Amount Units”，设置浓度单位；选择“Calibration”项下“Calibration Setting”，修改“Default
CalibrationCurve”，选择合适的曲线类型-Type，是否过原点-Origin和各点对于标准曲线的比重-
Weight，通常选Equal）
4、调出样品谱图，点击需要计算浓度的色谱峰，选择“Report” 菜单中的“Specify Report”，选
择“Report style”为“Detail”，点击“OK”后选择“打印预览”图标，在报告中即可体现计算结果。
七、 图谱重叠设置：
1、选择“File”菜单下“Overlay Signal”选项，选择任意需要重叠的图谱；
2、在“Signal”选项下，选择“3D Signal Overlay”图标（紧邻图谱上方左起第四个图标），在弹出
的“Adjust Signal OverlayOptions”对话框中调节交错时间和高度；若想移除重叠谱图，点击第六个图
标。
八、信噪比等参数计算：
1、选择“Report”菜单中的“System Suitability”项下的“Edit Noise Range”选项，设置时间范围（超过
1min）；
2、选择“Report” 菜单中的“Specify Report”，选择“Report style”为“Perfomance+Noise”，点
击“OK”后，即可预览信噪比参数；
3、选择“Report” 菜单中的“Specify Report”，选择“Report style”为“Extended Perfomance”，点
击“OK”后，即可预览对称性、拖尾因子等所有参数。
九、程序运行时检测出峰情况：
选择“File”菜单下的“Snapshot”选项即可。
十、打印报告：
1、从“Report”菜单中选择“Report Mode”，选择“Use Classic Reporting”；
2、从“Report”菜单中选择“打印报告”，则报告结果将被打印。
十一、关机：
1、冲洗色谱柱和系统后，退出化学工作站及其它窗口，关闭计算机；
2、关闭Agilent 1260各模块电源开关。
扩展资料
定义：液相色谱是一类分离与分析技术，其特点是以液体作为流动相，固定相可以有多种形式，如
纸、薄板和填充床等。在色谱技术发展的过程中．为了区分各种方法，根据固定相的形式产生
了各自的命名，如纸色谱、薄层色谱和柱液相色谱。
基本原理：使用高效液相色谱时，液体待检测物被注入色谱柱，通过压力在固定相中移动，由
于被测物种不同物质与固定相的相互作用不同，不同的物质顺序离开色谱柱，通过检测器得到
不同的峰信号，最后通过分析比对这些信号来判断待测物所含有的物质。高效液相色谱作为一
种重要的分析方法，广泛地应用于化学和生化分析中。高效液相色谱从原理上与经典的液相色
谱没有本质的差别，它的特点是采用了高压输液泵、高灵敏度检测器和高效微粒固定相，适于
分析高沸点不易挥发、分子量大、不同极性的有机化合物。
高效液相色谱系统主要由流动相储液瓶、输液泵、进样器、色谱柱、检测器和记录仪组成，其整体
组成类似于气相色谱，但是针对其流动相为液体的特点作出很多调整。高效液相色谱的输液泵要求
输液量恒定平稳，进样系统要求进样便利、切换严密。同时，由于液体流动相黏度远远高于气体，
为了减低柱压，高效液相色谱的色谱柱一般比较粗，长度也远小于气相色谱柱。
参考资料：百度百科-液相色谱
哈美顿（上海）实验器材有限公司
2024-11-20 广告
