Question

western提取组织内核蛋白方法

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Answer 1

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Answer 2

其实和抽提普通蛋白不同的地方就在于要将核蛋白和胞浆蛋白分开。所以使用的裂解液既不能太剧烈，否则会在同一时间将胞膜和核膜都溶掉，导致核蛋白和胞浆蛋白混在一起，起不到分离的作用，也不能太温和，不然胞膜破了，核膜还完整，也分离不出核蛋白。
常规有人会做密度梯度离心法，通过长时间高速离心，先把细胞核分离出来，再从核里面去提蛋白。不过时间挺长的，做起来也麻烦。
我们实验室做的时候，都是买分离试剂盒来做，好像是Pierce的NE-PER还是什么，可以先裂胞膜，收集胞浆蛋白以后，再裂核膜，分离核蛋白。做起来还是很快的，反正比超速离心的方法要简单。