普通RT-PCR与实时荧光定量PCR的引物有什么区别?

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僪文赋板惠
2019-11-24 · TA获得超过2.9万个赞
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普通RT-PCR是半定量的。。即需要从条带的亮度判断量的相对多少。。
荧光定量PCR是定量的。。
因为两者反应体系,要求有很大区别,引物通常不能通用。除了上面提到的荧光定量PCR产物要控制在60-200nt之间,退火温度也比较高。。一般要达到60度
GRS塑料
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奉俏丽奈鲸
2019-11-21 · TA获得超过3万个赞
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实时定量的引物设计要求比较高,可以按普通引物设计的方法来做,但是设计时要注意扩增的片段不能太大,最好在250bp-100bp之间.同时要保证这对引物有绝对的特异性,因为要是产生非特异性扩增的话,就不能准确的计量模板量了,这样就失去了实时定量的意义了
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常映寒黄彦
2019-11-23 · TA获得超过2.9万个赞
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区别
http://baike.baidu.com/view/630506.htm
如果rt-pcr的扩增产物只有1,200bp,而且足够保守可以定位荧光PCR的目的基因
那就可以通用
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