Question

简述蛋白质变性的主要因素及如何在分离纯化减少其变性的机会

Answer 1

1.
强酸，强碱，盐，高温，反复冻融是导致蛋白变性的主要因素。
2.
蛋白分离纯化中注意：
（1）所用的缓冲液要注意调ph
（2）在分离纯化过程中保持低温
（3）纯化前处理菌液时，如his纯化，要在搅拌时缓慢加入缓冲液及氯化钠，防止蛋白局部变性。
（4）得到蛋白后最好分装，不要反复冻融，否则蛋白易变性，酶易失活。