紫外可见分光光度法是什么?
紫外-可见光光谱(Ultraviolet–visible spectroscopy,UV-Vis),又称紫外-可见分子吸收光谱法,是以紫外线-可见光区域电磁波连续光谱作为光源照射样品,研究物质分子对光吸收的相对强度的方法。
通过分子紫外-可见分子吸收光谱法的分析可以进行定性分析,并可依据朗伯-比尔定律进行定量分析。
当光的波长减小到一定数值时,溶剂对它产生强烈的吸收,即“端吸收”,样品测试就在“端吸收”的透明界限之内。
光具有与其波长成反比的一定量的能量。因此,较短波长的光携带更多的能量,而较长波长的光携带较少的能量。需要特定数量的能量来将物质中的电子提升到更高的能量状态,我们可以将其检测为吸收。
物质中不同键合环境中的电子需要不同的特定能量来促使电子达到更高的能量状态。这就是为什么在不同物质中对不同波长会发生光吸收的原因。人类能够看到一系列可见光,从大约 380 nm(我们看到的紫色)到 780 nm(我们看到的红色)。
1紫外光的波长比可见光短,约为 100 nm。因此,光可以通过其波长来描述,这在 UV-Vis 光谱中可用于通过定位与最大吸光度相对应的特定波长来分析或识别不同的物质(参见 UV-Vis 光谱的应用部分)。
对溶剂要求
含有杂原子的有机溶剂,通常均具有很强的末端吸收。因此,当作溶剂使用时,它们的使用范围均不能小于截止使用波长。例如甲醇、乙醇的截止使用波长为205nm 。另外,当溶剂不纯时,也可能增加干扰吸收。
因此,在测定供试品前,应先检查所用的溶剂在供试品所用的波长附近是否符合要求,即将溶剂置1cm石英吸收池中,以空气为空白(即空白光路中不置任何物质)测定其吸光度。
溶剂和吸收池的吸光度,在220~240nm 范围内不得超过0.40,在241~250nm范围内不得超过0.20,在251~300nm范围内不得超过0.10,在300nm以上时不得超过0.05。