薄层色谱法,样品为什么不出斑点
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2017-02-22 · 打造可传承的民族化工灌装机品牌
长春北方化工灌装设备股份有限公司
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TLC不出斑点,无非是这样几种原因:量太少、没有展开(或者展开过头都集中到前沿了)、显色方法不对,等等。如果你的对照正常,那么后两个原因就可以排除,第一个原因的可能性最大。
一般第一次展开显色的时候,同一个样品可以点上几个不同量的点,判断需要点多少的量最合适。
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北京理加联合科技有限公司
2023-06-13 广告
2023-06-13 广告
光谱分析是一种通过分析物质的光谱来确定其化学组成和相对含量的方法。光谱分析法基于光谱学的原理,利用光源发出的光经过物质反射、透射或吸收后,被光谱仪记录下来,然后经过处理和分析,得到物质的光谱信息,从而确定其组成和相对含量。光谱分析法有很多种...
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拖尾现象产生之原因及解决方法:
1、点样量太多,展开剂不能全部负载。
解决方法:寻出合适之点样量后,再进行层析。
2、展开剂pH值偏高。如以中性展开剂层析酸性物质时,常形成斑点拖尾。
解决方法:在展开剂中加入酸,使解离受到抑制,即可防止斑点拖尾。
3、展开剂的pH值偏低。如以中性展开剂层析生物碱和其它弱碱时,常观察到斑点拖尾。
解决方法:在层析K值在10-3~10-8的碱性化合物时,展开剂应调至碱性(如加入吡啶、二乙胺等)。
4、吸附剂pH的影响。 由于化合物与薄层上的酸、碱成盐而产生拖尾现象。
解决方法:换用pH合适的吸附剂或调整展开剂的pH,如加入酸或碱等。
5、吸附剂和展开剂中痕迹量的金属离子(如Ca2+、Mg2+等),使层析后的斑点形成拖尾。特别是被展开的化合物具有-COOH及酚-OH等基团时。
解决方法:采用纯净的酸来洗涤和处理吸附剂。展开剂可用精制的方法来除去金属离子。
扩展资料:
薄层色谱法的优点:
它保持了操作方便、设备简单、显色容易等特点,同时展开速率快,一般仅需15~20分钟;混合物易分离,分辨力一般比以往的纸层析高10~100倍。
它既适用于只有0.01μg的样品分离,又能分离大于500mg的样品作制备用,而且还可以使用如浓硫酸、浓盐酸之类的腐蚀性显色剂。薄层层析的缺点是对生物高分子的分离效果不甚理想。
1、点样量太多,展开剂不能全部负载。
解决方法:寻出合适之点样量后,再进行层析。
2、展开剂pH值偏高。如以中性展开剂层析酸性物质时,常形成斑点拖尾。
解决方法:在展开剂中加入酸,使解离受到抑制,即可防止斑点拖尾。
3、展开剂的pH值偏低。如以中性展开剂层析生物碱和其它弱碱时,常观察到斑点拖尾。
解决方法:在层析K值在10-3~10-8的碱性化合物时,展开剂应调至碱性(如加入吡啶、二乙胺等)。
4、吸附剂pH的影响。 由于化合物与薄层上的酸、碱成盐而产生拖尾现象。
解决方法:换用pH合适的吸附剂或调整展开剂的pH,如加入酸或碱等。
5、吸附剂和展开剂中痕迹量的金属离子(如Ca2+、Mg2+等),使层析后的斑点形成拖尾。特别是被展开的化合物具有-COOH及酚-OH等基团时。
解决方法:采用纯净的酸来洗涤和处理吸附剂。展开剂可用精制的方法来除去金属离子。
扩展资料:
薄层色谱法的优点:
它保持了操作方便、设备简单、显色容易等特点,同时展开速率快,一般仅需15~20分钟;混合物易分离,分辨力一般比以往的纸层析高10~100倍。
它既适用于只有0.01μg的样品分离,又能分离大于500mg的样品作制备用,而且还可以使用如浓硫酸、浓盐酸之类的腐蚀性显色剂。薄层层析的缺点是对生物高分子的分离效果不甚理想。
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样品如果没有共轭结构的话就紫外线下就不会显色
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你的待测物本身有颜色么?用不用加显色剂?
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