
碱裂解法大量提取质粒是什么原理?
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1、取培养至对数生长后期(一般培养12~16小时)的含待提质粒的细菌培养液于离心杯中,配平,4℃下4000rpm离心15min,弃上清,然后将离心管倒置于干净的约纸上使上清液全部流尽。
2、向盛有细菌沉淀物的离心管中加入20mL冰冷的溶液Ⅰ,重悬沉淀(先加5mL溶液Ⅰ,用干净的玻璃棒搅拌均匀后,再加剩下的部分)。
3、加入40mL冰冷的新配制的溶液Ⅱ,盖紧瓶盖,缓缓地颠倒离心数次,使离心管内溶物充分混匀。此步需注意:混匀过程不可用力过猛,否则容易导致基因组DNA污染。正确的方法是:缓缓地颠倒离心管数次或双手持管使其轴线水平,并使管沿轴线旋转,直到内容物粘稠有“拉丝”为止。
详细的方法步骤可以登陆生物帮了解一下,
http://doc.bio1000.com/list-39.html
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2024-04-23 广告
质粒裂解系统是一种高效的生物技术工具,用于从细菌中提取质粒DNA。该系统基于特定的裂解缓冲液和蛋白酶,能够快速、选择性地破坏细菌细胞壁和细胞膜,释放质粒DNA。与传统的煮沸法或碱裂解法相比,质粒裂解系统具有更高的提取效率和纯度,操作简便,节...
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