实时荧光定量PCR的一点问题

定量PCR实验步骤(以mRNA为例):1.设计实验方案:例如对样品、实验组和对照组的一个实验流程设计2.引物和探针的设计和合成3.抽提RNA,测定提取的RNA的浓度4.反... 定量PCR实验步骤(以mRNA为例):

1. 设计实验方案:例如对样品、实验组和对照组的一个实验流程设计

2. 引物和探针的设计和合成

3. 抽提RNA,测定提取的RNA的浓度

4. 反转录PCR

5. 定量PCR

6. 数据分析

为什么在步骤中要抽提RNA,并要反转录PCR 请详细解释
为什么不能直接扩增 mRNA 而要反转录之后扩增cDNA?
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zytx_1985
2010-07-19 · TA获得超过731个赞
知道小有建树答主
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实时定量目的就在于测定样品mRNA水平的含量啊!要获取扩增反应之初的模板量,必然要先提取总RNA,用多聚T引物将全部的mRNA反转录得到cDNA作为模板,再通过后续检测得出结果。
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GRS塑料
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jinrongyu613
2010-07-19 · TA获得超过2.2万个赞
知道大有可为答主
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这样可以测量某个基因的表达量

实时荧光定量PCR的实验设计是根据你自己实验需要而定,并不是非要抽提RNA。你也可以用质粒DNA等做模板。从你的实验需求出发
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秒懂百科
2021-05-22 · TA获得超过5.9万个赞
知道大有可为答主
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