Question

测量细胞内ros 用裂解细胞吗

Answer 1

建议直接购买SIGMA的DCFH-DA，380元左右吧，荧光效果相当好。
我们同一实验分别采用了碧云天的试剂盒和SIGMA的DCFH-DA粉剂，结果碧云天的荧光弱，而且组间无差别，用sigma的粉剂自己配置DCFH-DA溶液，一次出结果。有时图便宜反而更费钱啊。
SIGMA的DCFH-DA粉剂建议合买，一个人根本用不完。
取所需分量（够自己实验用的）直接用无血清培养基溶解即可，勿需任何溶媒处理，溶解性非常好。短期可4度保存。
我实验中是长期刺激细胞（10h），所以干预后才装载探针，终浓度10uM或20uM都可。贴壁状态下直接装载，避光孵育30min，PBS洗2遍，消化至悬，上流式检测。荧光强度与细胞内活性氧水平成正比。