生物信息学在分离克隆基因中有哪些应用?
2019-06-15 · 农业农村部直属的大型综合出版社
生物信息学(bioinformatics)是生物学、计算机科学以及应用数学等学科相互交叉而形成的一门新兴学科,它以计算机为主要工具,开发各种软件,对日益增长的DNA和蛋白质的序列和结构等相关信息进行收集、储存、发行、提取、加工、分析和研究,同时建立理论模型,指导实验研究。基因组信息学的首要任务之一就是发现新的基因。
如利用EST数据库发现新基因(电脑克隆),寻找到与克隆有关的EST后,用电子cDNA文库进行筛选;通过生物信息学软件进行分析和查询,最终获得一个基因的全长cDNA;通过保守区发现和克隆基因,即利用同源蛋白质的保守序列或同源基因区段进行电子筛选,再进一步拼接、延伸从而获得全长的cDNA;从大规模cDNA文库测序的序列中确定新基因,首先确定获得的cDNA是否为基因全长cDNA,确定是否有典型的阅读框(ORF)及3′端及5′端。而后可以通过网上搜索确定是否为新的基因,若通过检验则为新基因。
除上述几种基本的方法外,随着生物技术的发展和传统技术的改良,基因克隆的方法又有许多新的技术出现,如基因表达序类标记分析(SAGE);由DDRT-PCR演变而来的代表性差异分析(RDA),包括基因组DNA(gDNA)的RDA和cDNA的RDA;转录活动的DNA差减杂交技术(TADSH)、利用限制性片段多态性的cDNA-AFLP等等,这些技术作为基因分离克隆的方法,较以前的技术都具有一定的优点,又有各自的不尽相同的用途。
2024-11-08 广告