Question

图1为几种限制性核酸内切酶识别的序列和切割的位点．如图2，已知某DNA在目的基因的两端1、2、3、4四处有B

图1为几种限制性核酸内切酶识别的序列和切割的位点．如图2，已知某DNA在目的基因的两端1、2、3、4四处有BamHⅠ或EcoRⅠ或PstⅠ的酶切位点．现用PstⅠ和EcoRⅠ两种酶同时切割该DNA片段（假设所用的酶均可将识别位点完全切开），下列各种酶切位点情况中，可以防止酶切后单个含目的基因的DNA片段自身连接成环状的是（　　）限制酶BamHⅠEcoRⅠPstⅠ识别序列和切割位点A．1为EcoRⅠ，2为BamHⅠ，3为EcoRⅠ，4为PstⅠB．1为BamHⅠ，2为EcoRⅠ，3为EcoRⅠ，4为PstⅠC．1为EcoRⅠ，2为PstⅠ，3为PstⅠ，4为BamHⅠD．1为BamHⅠ，2为EcoRⅠ，3为PstⅠ，4为EcoRⅠ

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Answer 1

A、如果1为EcoRⅠ，2为BamHⅠ，3为EcoRⅠ，4为PstⅠ，用PstⅠ和EcoRⅠ两种酶同时切割该DNA片段，则切割后含有目的基因的片段两侧有相同的黏性末端（1处和3处），会出现自身环化，A错误；
B、如果2为EcoRⅠ，3为EcoRⅠ则切割后含有目的基因的片段两侧有相同的黏性末端（2处和3处），会出现自身环化，B错误；
C、如果2为PstⅠ，3为PstⅠ，则切割后含有目的基因的片段两侧有相同的黏性末端（2处和3处），会出现自身环化，C错误；
D、如果1为BamHⅠ，2为EcoRⅠ，3为PstⅠ，4为EcoRⅠ，则切割后含有目的基因的片段两侧有不同的黏性末端（2处和3处），可以防止酶切后单个含目的基因的DNA片段自身连接成环状，D正确．
故选：D．