猪水疱病的诊断
本病根据临床症状和病理变化很难与口蹄疫、猪水疱性口炎等区分开来,必须进行实验室诊断加以区别。
病毒分离与鉴定取病猪未破溃或刚破溃的水疱皮,经处理后,颈部皮下接种2~3日龄的吮乳小白鼠。一般在最初1~2代内即可引起感染,实验动物发病死亡。初代分离如呈阴性结果,应继续盲传2~3代,分离毒可用猪水疱病抗血清中和后,接种2日龄乳鼠以鉴定分离毒。如注射猪水疱病免疫血清中和组小鼠健活,病毒对照或用各型口蹄疫免疫血清中和对照的乳鼠发病死亡,则被检病料为猪水疱病病毒,而不是口蹄疫病毒。
荧光抗体试验用直接和间接免疫荧光抗体试验,可检出病猪淋巴结冰冻切片中的感染细胞,也可检出水疱皮和肌肉中的病毒。
中和试验、反向间接红细胞凝集试验、补体结合试验等也常用于猪水疱病的的诊断。
生物学诊断:将病料分别接种1-2日龄和7-9日龄小数,如2组小鼠均死亡,则为口蹄疫。1-2日龄小鼠死亡,而7-9日龄小鼠不死者,为猪水疱病。如病料经过pH3-5缓冲液处理,接种1-2日龄小鼠死亡者为猪水疱病,反之则为口蹄疫。
免疫双扩散试验:待检血清孔与抗原孔之间出现沉淀线且与阳性对照沉淀线的末端完全融合,则判为阳性。
血清中和试验:测定每一份待检血清中的SVDV抗体,需设4排孔,每排孔的内容完全一样。如果病毒被血清中和,细胞不产生CPE,细胞呈蓝色,判为阳性。
ELISA方法检测血清抗体