Question

体细胞核移植技术中，为什么用次级卵母细胞作为受体细胞，而不使用受精卵？

Answer 1

外泌体多数情况下，细胞在体外培养需要血清，但血清中含有外泌体，为了避免血清污染细胞产生的外泌体，一般采用2种方法：①细胞培养前，通过100000??g超速离心过夜，去除血清外泌体。②可选择无血清培养基进行培养。宇玫博生物正在免费提供外泌体提取试剂盒，数量有限，先申请先得。

Answer 2

>细胞核移植技术中能用受体细胞的通常有MⅡ期卵母细胞和受精卵。早期的核移植常用受精卵，后来基本上用MⅡ期卵母细胞取代了受精卵，主要是两者的细胞质环境不同。有人认为重组需要的因子存在于MⅡ期卵母细胞质中，而在受精卵形成时这些因子已被降解或用光，因此受精卵去核可引起细胞质中重组因子缺乏。促成熟因子（MFP）是卵母细胞质中重要的胞质影响因子，MFP的活性在卵母细胞减数分裂的MⅠ和MⅡ期达到最高，受精或激活后MFP迅速失活，因此MⅡ期卵母细胞中MFP活性高，而受精卵中MFP活性低。而MFP水平的高低可影响供体核染色质的状态和复制。MⅡ期卵母细胞细胞核、细胞质已成熟，而MⅠ期卵母细胞细胞核、细胞质尚未成熟，其细胞质不能支持胚胎的全程发育，因此尽管MⅠ期卵母细胞MFP活性也高，但不能作为受体卵母细胞。也有人认为用去核受精卵作受体时可能由于受精卵去核时一些早期发育必需的因子随核的去除而去掉，而使受精卵缺乏发育能力。因此，目前广泛采用MⅡQI
5卵母细胞做受体。
细胞核移植用的是处于减数第二次分裂中期的次级卵母细胞的细胞质。此时的细胞质有助于恢复细胞核的全能性。此时所说“细胞核”实际上主要指的是核区的染色体。不能机械的理解为“细胞核结构”

Answer 3

因为体内受精时卵子是发育到减数第二次分裂中期才具备与精子受精能力的,而且减数第二次分裂中期的卵子细胞质中,含有促进细胞核全能性表达的物质.而体细胞核移植过程中，卵细胞体积大，营养物质多，容易操作。这些都是原因。