Question

微生物染色原理

Answer 1

阳性菌厚，不容易脱色，阴性菌容易被乙醇脱色。所以一个可以被显紫色一个土黄色。但操作不当，染色过度。容易出现假阳性。
革兰氏染色的原理
1、G＋细胞壁主要由肽聚糖形成的致密网状结构组成，壁厚，类脂含量低，交联度高，用乙醇处理后，发生脱水作用，肽聚糖层孔径缩小，透性降低，从而使结晶紫-碘复合物不易被洗脱而保留再细胞内，故细菌仍保留初染时的紫色。
2、G－肽聚糖层较薄，交联度低，含较多类脂质，故用乙醇处理后，类脂质被溶解，细胞壁孔径变大，通透性增加，使初染的结晶紫和碘的复合物易于渗出，细胞被脱色，经沙黄复染后呈红色。
二、革兰氏染色的步骤
1、制片
涂片——干燥——固定
2、初染
滴加结晶紫染色1~2分钟，水洗；
3、媒染
用碘液冲去残水，并用碘液覆盖1分钟；
4、脱色
滴加95%酒精，脱色30秒，立即水洗；
5、复染
用番红液复染1~2分钟，水洗；
6、镜检
干燥后，用油镜观察。先低倍镜再高倍镜。油镜使用结束后，要及时用擦镜纸擦干净镜头，避免香柏油残留