Question

革兰氏染色的目的、原理是什么?试述细菌革兰氏染色法步骤。

Answer 1

【答案】：目的：通过革兰氏染色可分析细菌细胞结构、成分、形态、生理等生物学特征的差异，是经典的细菌分类和鉴定指标。
原理：革兰氏阳性菌含有40～90的肽聚糖，很少的脂类1～4%。革兰氏阴性菌含有很多的脂类11～22，较少的肽聚糖10%。用乙醇脱色时，对于阴性菌，乙醇可以溶解脂类在细胞壁形成较大的孔径及通透性，乙醇可轻易进入阴性细菌降染料提取出来，使菌体呈无色。对于阳性菌，由于脂类少，但肽聚糖高，乙醇又是脱水剂，使肽聚糖脱水，导致细胞壁的孔径变小，通透性变差，阻止乙醇进入菌体内，阳性菌不褪色。
步骤
1)无菌条件下，将部分细菌置于载玻片上，涂匀;
2)用草酸铵结晶紫染色1min，水洗去浮色;
3)用碘-碘化钾溶液染1min，去掉多余溶液;
4)用中性的脱色剂如乙醇脱色，革兰氏阳性菌不褪色呈紫色，革兰氏阴性菌褪色呈无色。
5)用蕃红复染1min，阳性菌为紫色，阴性菌为红色。