Question

细胞活性检测方法及原理？

Answer 1

细胞活性检测是用于评估细胞在不同条件下的存活状况和生长情况，可以帮助我们了解各种因素对细胞生长和代谢的影响，如D素、生长因子、细胞培养条件等。以下是常用的细胞活性检测方法及其原理：

1、MTT法

MTT法是一种使用MTT（3-(4,5-二甲基-2-噻唑唑-5-基)-2,5-二苯基四氮唑）的间接法，评估细胞代谢和存活状态的变化。MTT是一种无色的水溶性化合物，通过细胞线粒体中的NAD(P)H脱氢酶活性将其还原为有色的紫色甲烷基偶氮苯盐formazan，然后用DMSO或酸性异丙醇提取出甲烷基偶氮苯盐，最后用分光光度计测定其吸光度来评估细胞的代谢活性和存活率。

2、CCK-8法

CCK-8法（Cell Counting Kit-8）评估细胞代谢和存活状态变化的直接法。CCK-8是一种黄色水溶性试剂，通过细胞线粒体中的脱氢酶活性将其还原为橙色的可溶性产物Formazan，然后测量其吸收光度，以评估细胞的代谢活性和存活率。

3、SRB法

SRB法是一种使用SRB（Sulforhodamine B）染色的间接法，评估细胞生长和存活状态的变化。SRB是一种红色荧光染料，可以与细胞蛋白质结合，形成一种稳定的复合物，在乙醇或酸性异丙醇中可溶解并定量测定。静止SRB染色的作用是在细胞固定和染色后，将其板洗净，然后用碱性的乙醇洗去非结合SRB，并通过读取吸光度来定量测定结合SRB的含量，从而评估细胞的生长和存活状态。

以上提到的三种细胞活性检测方法都是基于外源试剂能够与细胞代谢产物结合形成新产物、反应产物或染色产物的原理，从而间接或直接的评估细胞的活性和生物学特性。每种方法都有其优缺点，实验者应根据实验需求、细胞类型及检测的目的选择合适的方法。

Answer 2

细胞活性检测可以对细胞的形态，产能通路等做研究，对产能通路的研究主要是研究两条最重要的能量代谢通路，有氧呼吸及糖酵解