Question

基因工程选择题

13．下图是将人的生长激素基因导入细菌B细胞内制造“工程菌”的示意图。已知细菌B细胞内不含质粒A，也不含质粒A上的基因。判断下列说法正确的是
A．将重组质粒导入细菌B常用的方法是显微注射法或基因枪法
B．将完成导入过程后的细菌涂布在含有氨苄青霉素的培养基上，能生长的只是导入了重组质粒的细菌
C．将完成导入过程后的细菌涂布在含有四环素的培养基上，能生长的就是导入了质粒A的细菌
D．目的基因成功表达的标志是受体细胞能在含有氨苄青霉素的培养基上生长

我觉得 选D 但答案给了C

Answer 1

楼上的解释没有切中要害，我补充一下。
首先，C选项是正确的。因为重组质粒中的四环素抗性基因已经被人的生长激素基因给插入缺失了，所以在含有四环素的培养基上，能够生长的就是含有A质粒而不是重组质粒的重组菌。
其次，D选项是错误的。因为无论是重组质粒还是原质粒都是含有氨苄青霉素抗性的，从图示中可以看到。所以通过含有氨苄青霉素的培养基只能筛出导入质粒（包括A质粒和重组质粒）的重组菌。根据是否含有目的基因，记为A和B，假设其中B含有目的基因。除此之外，楼上说到，生长激素是否被排除菌体外，要根据所选用的工程载体而言，即质粒的类型，是表达型的还是分泌型或者穿梭载体等，而不是根据细菌是否利用进行判断。
该实验正确的筛选方法是：
将培养后的菌悬液梯度稀释，选合适的3—5个稀释度，取适量均匀涂抹到含有合适浓度氨苄青霉素的平板（1号平板）上。培养过夜后，标记好菌落的位置和方向，采用影印法将菌落印到含有氨苄青霉素和四环素的平板（2号平板）上，过夜培养后，对比1号平板和2号平板，在1号平板上存在而在2号平板上不存在的菌落就是我们要筛选的工程菌菌落。再从1号平板上取菌，保存即可！
如果你想要更详细的了解“影印法”，你可以百度搜索一下，应该有的！

Answer 2

首先说D是错的
目的基因成功表达的标志应该是受体细胞生成人的生长激素；
人的生长激素对细菌并没有促进生长的作用，会被其排出体外，经过塞选加工供人类利用；
所以受体细胞能在含有氨苄青霉素的培养基上生长只能说明导入抗氨苄青霉素基因成功，而目的基因是人生长激素基因，D不对
C是对的
完成导入的能在含四环素培养基上生长说明受体细胞内含有抗四环素基因，而原细胞并不含质粒A中的抗四环素基因，该基因必为导入的质粒A上，因此这些细菌是导入了质粒A的细菌