Question

重组DNA(基因工程)的主要步骤。

Answer 1

【答案】：重组DNA的主要步骤主要包括以下4个基本步骤：
(1)目的基因的获得；
(2)目的基因与载体分子在体外进行连接反应，形成重组体；
(3)将人工重组的DNA分子导入能进行正常复制的寄主细胞，从而得到复制：
(4)重组体分子的转化子克隆的选择和筛选。[考点]重组DNA的过程。重组DNA也叫基因工程，指指在体外将核酸分子插入病毒、质粒或其他载体分子中，构成遗传物质的重新组合，使之进入原先没有这类分子的寄主细胞内并进行持续稳定的繁殖和表达的过程。重组DNA技术包括如下步骤：
(1)目的基因的获得：通过一定的方法得到需要进行操作的目的DNA，常用的方法有化学合成法，基因组文库法和cDNA文库法。
(2)目的基因与载体分子在体外进行连接反应，形成重组体：通过限制性内切酶对含目标片段的DNA和载体进行切割后，通过DNA连接酶进行连接，完成基因的重组过程。
(3)将人工重组的DNA分子导入能进行正常复制的寄主细胞，从而得到复制：重组。DNA必须导入到宿主细胞中，随着宿主细胞的分裂而进行复制。
(4)重组体分子的转化子克隆的选择和筛选：通过一定的方法进行重组子的筛选，常用的方法有蓝白斑筛选法和抗生素筛选法。