简述放射性核素碘标记的常用方法。
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【答案】:放射性核素碘标记的常用方法有亲电取代标记与连接标记。
(1)亲电取代标记:也称为氧化法,将Na131I中的碘离子用氧化剂氧化成碘分子与+1价离子,经亲电取代反应机制标记在含酪氨酸、组氨酸等的苯环上。包括有:①氯胺T法:用氯胺T作氧化剂,用连二亚硫酸钠终止反应。标记率高,但对蛋白质生物活性有损伤。②固相氧化法(Iodogen或Iodobead法):将氧化剂均匀涂布在反应管上或塑料微球上,氧化反应在固液两相界面上进行,取出反应液即终止反应。反应温和,对蛋白质生物活性损伤小。③乳过氧化物酶法:用乳过氧化物酶法与微量氧化剂(H2O2)底物进行氧化,反应温和,对蛋白质生物活性损伤小。
(2)连接标记:先用123I或131I标记一前体,再将标记的前体与待标记的蛋白质等分子连接。常用的前体有对羟苯丙酸N-羟琥珀酰胺酯(N-SHPP,Bolton-Hunter试剂)、对氨基苯磺酸等。
(1)亲电取代标记:也称为氧化法,将Na131I中的碘离子用氧化剂氧化成碘分子与+1价离子,经亲电取代反应机制标记在含酪氨酸、组氨酸等的苯环上。包括有:①氯胺T法:用氯胺T作氧化剂,用连二亚硫酸钠终止反应。标记率高,但对蛋白质生物活性有损伤。②固相氧化法(Iodogen或Iodobead法):将氧化剂均匀涂布在反应管上或塑料微球上,氧化反应在固液两相界面上进行,取出反应液即终止反应。反应温和,对蛋白质生物活性损伤小。③乳过氧化物酶法:用乳过氧化物酶法与微量氧化剂(H2O2)底物进行氧化,反应温和,对蛋白质生物活性损伤小。
(2)连接标记:先用123I或131I标记一前体,再将标记的前体与待标记的蛋白质等分子连接。常用的前体有对羟苯丙酸N-羟琥珀酰胺酯(N-SHPP,Bolton-Hunter试剂)、对氨基苯磺酸等。
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