Question

中药化学中简述tlc的操作过程

Answer 1

飞秒检测在长期的实践中总结了完成TLC分析的过程，一般需经制板、点样、展开、检出4步操作。一、制板。在一平面支持物(通常玻璃)上，均匀地涂制硅胶、氧化铝或其他吸附剂薄层、样品的分离、检测就在此薄层色谱板上进行。
二、点样
用微量进样器进行点样。先用铅笔在层析上距末端lcm 处轻轻画一横线，然后用毛细管吸取样液在横线上轻轻点样，如果要重新点样，一定要等前一次点样残余的溶剂挥发后再点样，以免点样斑点过。一般斑点直径大于2mm，不宜超过5mm.底线距基线1～2．5cm，点间距离为lcm左右，样点与玻璃边缘距离至少lcm，为防止边缘效应，可将薄层板两边刮去1～2cm，再进行点样。
三、展开
将点了样的薄层板放在盛在有展开剂的展开槽中，由于毛细管作用，展开溶剂在薄层板上缓慢前进，前进至一定距离后，取出薄层板，样品组分固移动速度不同而彼此分离。 ① 展开室应预饱和。为达到饱和效果，可在室中加入足够量的展开剂；或者在壁上贴两条与室一样高、
宽的滤纸条，一端浸入展开剂中，密封室顶的盖。 ② 展开剂一般为两种以上互溶的有机溶剂，并且临用时新配为宜。 ③ 薄层板点样后，应待溶剂挥发完，再放人展开室中展开。④ 展开应密闭，展距一般为8～15cm。薄层板放入展开室时，展开剂不能没过样点。一般情况下，展开剂浸入薄层下端的高度不宜超过0.5cm。 ⑤ 展开剂每次展开后，都需要换，不能重复使用。 ⑥ 展开后的薄层板用适当的方法，使溶剂挥发完全，然后进行检视。⑦ Rf值一般控制在0.3～0.8，当Rf值很大或很小时，应适当改变流动相的比例
四、斑点的检出
展开后的薄层板经过干燥后，常用紫外光灯照射或用显色剂显色检出斑点。对于无色组分，在用显色剂时，显色剂喷洒要均匀，量要适度。紫外光灯的功率越大，暗室越暗，检出效果就越好。 展开分离后，化合物在薄层板上的位置用比移值(Rf值)来表示。化合物斑点中心至原点的距离与溶剂前沿至原点的距离的比值就是该化合物的Rf值。