证明dna是半保留复制的试验
在此试验中,培养一代之后,有氮14/氮15带;第二代后,有氮14/氮15带、氮14带;可证明DNA是半保留复制。那么其中怎样控制细胞只复制一代?...
在此试验中,培养一代之后,有氮14/氮15带;
第二代后,有氮14/氮15带、氮14带;
可证明DNA是半保留复制。
那么 其中怎样控制细胞只复制一代? 展开
第二代后,有氮14/氮15带、氮14带;
可证明DNA是半保留复制。
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用聚合酶链式反应(PCR)
PCR是现今DNA体外复制的有效方法,通过控制循环数可控制DNA复制的代数
具体流程为:1、94摄氏度变性(破碎细胞,DNA解螺旋,并变性成单链,时间较长)
2、94摄氏度变性(时间短)
3、低温退火(据引物等实际情况确定温度)
4、中温延伸(一般为72摄氏度,这就是细胞中的复制过程)
5、继续延伸(时间短),该步骤可有可无
6、保温(12摄氏度),据具体情况可以删掉该步骤
以上是DNA复制一代的程序,如果需要增加复制代数,则用PCR仪进行2-4步的循环即可
具体知识可查阅《分子克隆》《分子生物学》等书
PCR是现今DNA体外复制的有效方法,通过控制循环数可控制DNA复制的代数
具体流程为:1、94摄氏度变性(破碎细胞,DNA解螺旋,并变性成单链,时间较长)
2、94摄氏度变性(时间短)
3、低温退火(据引物等实际情况确定温度)
4、中温延伸(一般为72摄氏度,这就是细胞中的复制过程)
5、继续延伸(时间短),该步骤可有可无
6、保温(12摄氏度),据具体情况可以删掉该步骤
以上是DNA复制一代的程序,如果需要增加复制代数,则用PCR仪进行2-4步的循环即可
具体知识可查阅《分子克隆》《分子生物学》等书
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半保留复制:是DNA复制的模式
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多代复制后,具有氮14/氮15的dna永远只有一条带
而具有氮14带可以有多条,不影响得出结论
至于如何控制培养一代,噬菌体是有溶菌周期的,可以在他未释放前剧烈震荡搅拌,把它的dna弄出来
而具有氮14带可以有多条,不影响得出结论
至于如何控制培养一代,噬菌体是有溶菌周期的,可以在他未释放前剧烈震荡搅拌,把它的dna弄出来
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