蛋白质沉淀法原理
原理:蛋白质通过盐析的办法沉淀的原理是降低蛋白质的溶解度,使蛋白质凝聚而从溶液中析出。
蛋白质分子聚集而从溶液中析出的现象,称为蛋白质的沉淀。由于水化层和双电层的存在,蛋白质溶液是一种稳定的胶体溶液。如果向蛋白质溶液中加入某种电解质,以破坏其颗粒表面的双电层或调节溶液的pH,使其达到等电点,蛋白质颗粒因失去电荷变得不稳定而将沉淀析出。
蛋白沉淀法是毒物分析过程中对生物样品进行前处理的一种常用方式。对于富 含蛋白质的检材,在进行分离、提取时要将 大量干扰测定的蛋白质沉淀除去,使待测毒 物仍留存于溶液中。
操作时一般要先将检材组织磨碎,然后再加入蛋白沉淀剂进行蛋白质沉淀,组织中的蛋白质与沉淀剂形成疏松的絮状沉淀物,而毒物则留在溶液中。
扩展资料:
有机溶剂易使蛋白质或酶变性,常采用降低温度的方法进行有效控制, 而且有机溶剂使用量大,溶剂的使用及回收;储存都比较困难或 麻烦。 盐析法:盐析法简单方便,可用于蛋白质抗原的粗提、丙种 球蛋白的提取、蛋白质的浓缩等。
盐析法提纯的抗原浓度不高,只用于抗原的初步纯化。 金属离子沉淀法纯度高,太耗电,沉淀效果很好,容易使生物分 子变性,复合物难分解。
选泽性变性沉淀法:溶解度下降、粘度 增加、紫外线吸收增加、侧链反应增强、对酶的作用敏感,易被 水解 (这就是为何蛋白类食品在被加热至变性后人体对其中氨基 酸的吸收。能力增强) 等电点沉淀法无机酸会引起较大的蛋白质不可逆变性的危险等电点装置复杂,也比较纯。
蛋白质变性指在某些物理和化学因素如热、有机溶剂、重金属离子、生物碱试剂等作用下,蛋白质特定的空间构象被破坏,也即有序的空间结构变成无序的空间结构,从而导致其理化性质改变和生物活性的丧失。
参考资料:百度百科——蛋白沉淀法
2024-11-08 广告