探究培养液中酵母菌种群数量的变化
培养液中酵母菌种群数量的变化应该满足阶型曲线的关系。
(1)用液体培养基培养酵母菌,种群的数量增长受培养液的成分、培养的空间、pH、温度等因素的影响。
(2)在理想环境中,酵母菌种群的增长呈“J”型曲线;在有限的环境条件下,酵母菌种群的增长呈“S”型曲线。在恒定培养液中当酵母菌种群数量达到K值后,还会转而下降直至全部死亡(营养物质消耗、代谢产物积累及pH变化所致)。
(3)计算酵母菌数量可用抽样检测的方法——显微计数法。
(4)本实验不需要专门设置对照实验,因不同时间取样已形成对照;需要做重复实验,目的是尽量减少误差,需对每个样品计数三次,取其平均值。
(5)从试管中吸出培养液进行计数前,需将试管轻轻振荡几次,目的是使培养液中的酵母菌均匀分布,减小误差。
(6)制片时,先将盖玻片放在计数室上,用吸管吸取培养液,滴于盖玻片边缘,让培养液自行渗入。多余培养液用滤纸吸去。
(7)制好装片后,应稍待片刻,待酵母菌全部沉降到计数室底部,再用显微镜进行观察、计数。
(8)显微镜计数时,对于压在小方格界线上的酵母菌,应遵循“数上线不数下线,数左线不数右线”的原则计数。
(9)如果一个小方格内酵母菌过多,难以数清,应当稀释培养液重新计数,以每小方格内含有4~5个酵母细胞为宜。稀释培养液时要进行定量稀释,便于计算。
培养液基本内容:
中文名称:培养液,英文名称:culture medium,其他名称:培养基,定义:用于进行组织或细胞培养的介质之统称。
Parker等根据氨基酸和维生素等物质的生理含量制备出一种基本培养液,后来Eagle等对来源于人的细胞株进行更深入的研究后发现胞质内的氨基酸及维生素的含量比基本培养液中大1-5倍,而且其中谷氨酰胺等13种氨基酸和8种维生素是必需的。
于是将这些物质的浓度调整到接近细胞质内含量的水平,制成了最低必需培养液(Eagle’s minimum essential medium, MEM),是常用的培养液。应用学科:细胞生物学(一级学科);细胞培养与细胞工程(二级学科)。
2023-07-19 广告