Question

革兰氏染色法的重要意义是什么

Answer 1

革兰氏染色法的重要意义是：
革兰氏染色法不仅用来观察细菌的形态，而且它还是细菌鉴定的重要方法，
微生物的细胞小且透明，在普通光学显微镜下不易识别，必须对它们进行染色，使经染色后的菌体与背景形成明显的色差，从而能更清楚地观察到其形态和结构。因此，微生物染色技术是观察微生物形态结构的重要手段。

革兰氏染色反应是细菌分类和鉴定的重要性状。它是1884年由丹麦医师Gram创立的。革兰氏染色法（Gram stain）不仅能观察到细菌的形态，而且还可将所有细菌区分为两大类：染色反应呈蓝紫色的称为革兰氏阳性细菌，用G+表示；染色反应呈红色（复染颜色）的称为革兰氏阴性细菌，用G-表示。细菌对革兰氏染色的不同反应，是由于它们细胞壁的成分和结构不同而造成的。革兰氏阳性细菌的细胞壁主要是由肽聚糖形成的网状结构组成的，在染色过程中，当用乙醇处理时，由于脱水而引起网状结构中的孔径变小，通透性降低，使结晶紫-碘复合物被保留在细胞内而不易脱色，因此，呈现蓝紫色；革兰氏阴性细菌的细胞壁中肽聚糖含量低，而脂类物质含量高，当用乙醇处理时，脂类物质溶解，细胞壁的通透性增加，使结晶紫-碘复合物易被乙醇抽出而脱色，然后又被染上了复染液（番红）的颜色，因此呈现红色。

Answer 2

取经火焰固定的标本片，加结晶紫液于涂片上，染色1分钟，轻轻用水冲去染液；片上加革兰氏碘溶液，作用1分钟，用水冲洗；倾尽玻片上的积水后，滴加适量95%乙醇于涂片上，作用0.5～1分钟，进行脱色；水洗后，以复红染液复染1分钟，水洗净用滤纸吸干后镜检。脱色是该染色法的关键，注意涂片不再有颜色褪下即停止，脱色时一般不要把染料倾去，应用水把染料浮起再冲去，以免染料颗粒附着在玻片上。本染色法可用于鉴别革兰氏阳性及阴性菌。

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Answer 3

可把细菌分为两大类，被染色的叫革兰氏阳性菌为被染色的叫革兰氏阴性菌

Answer 4

通过革兰氏染色区分微生物是G+还是G-从而选择恰当抗菌谱的药物。

Answer 5

重要意义：
为了研究细菌的形态，微生物学家发明了对细菌的染色，有用一种染色剂的称单染，仅能对细菌形态观察。用两种以上的称复染，革兰氏发明了复染色法；先后用两种染色剂和媒染剂、脱色剂组合，由此而命名为革兰染色。
革兰染色不仅可以观察细菌的形态，同时将细菌分为两大类。一类是染色阳性菌是紫色，另一类染色阴性的是红色。
由于细菌的结构上的差异，形成了不同的染色效果。了解染色性能有助于临床用药和细菌的鉴定；
如青霉素对革兰染色阳性菌有效，当化脓性细菌感染可首选药物。而氟哌酸对革兰染色阴性杆菌有效，如肠道病、腹泻为常用药。
当从尿道培养出革兰阴性双球菌，可以作为淋病感染的重要指症。如出现革兰染色阳性的葡萄球菌，又可作为金黄色葡萄球菌感染依据。
革兰氏染色法
是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法，这种染色法是由一位丹麦医生汉斯·克里斯蒂安·革兰（Hans Christian Gram，1853年－1938年）于1884年所发明，最初是用来鉴别肺炎球菌与克雷白氏肺炎菌之间的关系。

阳性紫色阴性红色
未经染色之细菌，由于其与周围环境折光率差别甚小，故在显微镜下极难观察
阳性紫色阴性红色。染色后细菌与环境形成鲜明
对比，可以清楚地观察到细菌的形态、排列及某些结构特征，而用以分类鉴定。
原理 通过结晶紫初染和碘液媒染后，在细胞壁内形成了不溶于水的结晶紫与碘的复合物，革兰氏阳性菌由于其细胞壁较厚、肽聚糖网层次较多且交联致密，故遇乙醇或丙酮脱色处理时，因失水反而使网孔缩小，再加上它不含类脂，故乙醇处理不会出现缝隙，，因此能把结晶紫与碘复合物牢牢留在壁内，使其仍呈紫色；而革兰氏阴性菌因其细胞壁薄、外膜层类脂含量高、肽聚糖层薄且交联度差，在遇脱色剂后，以类脂为主的外膜迅速溶解，薄而松散的肽聚糖网不能阻挡结晶紫与碘复合物的溶出，因此通过乙醇脱色后仍呈无色，再经沙黄等红色染料复染，就使革兰氏阴性菌呈红色。

致病菌
如:
金黄色葡萄球菌、绿色溶血性链球菌、肺炎球菌、白喉杆菌、炭疽杆菌等 属革兰氏染色阳性菌。
百日咳杆菌、大肠杆菌、伤寒杆菌、痢疾杆菌、霍乱弧菌、流行性脑膜炎双球菌、淋病双球菌等 属革兰氏阴性。
所以根据细菌的革兰氏染色性质，可以缩小鉴定范围，有利于进一步分离鉴定，以对疾病做出诊断。又由于各种抗生素的抗菌谱不同，革兰氏染色尚可做为选用抗生素的参考。

实验方法
革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤，具体操作方法是：
1）涂片固定。
2）草酸铵结晶紫染1分钟。
3）自来水冲洗。
4）加碘液覆盖涂面染约1分钟。
5）水洗，用吸水纸吸去水分。
6）加95%酒精数滴，并轻轻摇动进行脱色，20秒后水洗，吸去水分。
7）蕃红梁色液（稀）染2分钟后，自来水冲洗。干燥，镜检。

原理
通过结晶紫初染和碘液媒染后，在细胞壁内形成了不溶于水的结晶紫与碘的复合物，革兰氏阳性菌由于其细胞壁较厚、肽聚糖网层次较多且交联致密，故遇乙醇或丙酮脱色处理时，因失水反而使网孔缩小，再加上它不含类脂，故乙醇处理不会出现缝隙，，因此能把结晶紫与碘复合物牢牢留在壁内，使其仍呈紫色；而革兰氏阴性菌因其细胞壁薄、外膜层类脂含量高、肽聚糖层薄且交联度差，在遇脱色剂后，以类脂为主的外膜迅速溶解，薄而松散的肽聚糖网不能阻挡结晶紫与碘复合物的溶出，因此通过乙醇脱色后仍呈无色，再经沙黄等红色染料复染，就使革兰氏阴性菌呈红色。

染色结果

革兰氏正反应菌体都呈紫色，负反应菌体都呈红色。
临床意义
其重要的临床意义在于：1.鉴别细菌 2.选择药物 3.与致病性有关：：革兰氏阳性菌能产生外毒素，革兰氏阴性菌能产生内毒素，两者的致病作用不同。