Question

薄层色谱法的操作步骤及注意事项

Answer 1

薄层色谱法的操作步骤及注意事项如下：
1、薄层板点样后，应待溶剂挥发完，再放人展开室中展开。
2、展开应密闭，展距一般为8~15cm。薄层板放入展开室时，展开剂不能没过样点。一般情况下，展开剂浸入薄层下端的高度不宜超过0.5cm。
3、展开剂每次展开后，都需要换，不能重复使用。
4、展开后的薄层板用适当的方法，使溶剂挥发完全，然后进行检视。
5、Rf值一般控制在0.3~0.8，当Rf值很大或很小时，应适当改变流动相的比例。
注意事项：铺板用的匀浆不宜过稠或过稀：过稠，板容易出现拖动或停顿造成的层纹；过稀，水蒸发后，板表面较粗糙匀浆配比般是硅胶G：水=1：2～3，硅胶G：羧甲基纤维素钠水溶液=1：2。研磨匀浆的时间，根据经验来定，与空气湿度有关，一般通过拿起研棒时匀浆下滴的情况来判断，越稠越难下滴。匀浆的稀稠除影响板的平滑外，也影响板涂层的厚度，进一步影响上样量。涂层薄，点样易过载；涂层厚，显色不那么明显。通常，板的质量对薄层鉴别的影响不是很，影响最大的是展开剂的配制和展开系统的饱和。