Question

限制酶的产物

Answer 1

限制酶产生的末端
1．限制酶产生匹配粘端（matched ends）
识别位点为回文对称结构的序列经限制酶切割后，产生的末端为匹配粘端，亦即黏性末端（cohesive end），这样形成的两个末端是相同的，也是互补的。若在对称轴 5' 侧切割底物， DNA 双链交错断开产生 5' 突出粘性末端，如 EcoRⅠ ；若在 3'-侧切割，则产生 3' 突出粘性末端，如 KpnⅠ 。
NNG↓AATTCNN EcoRⅠ NNG AATTCNN

NNCTTAA↑GNN NNCTTAA GNN
2．限制酶产生平末端（Blunt end）
在回文对称轴上同时切割 DNA 的两条链，则产生平末端，如 HaeⅢ（GG↓CC）和 EcoRV（GAT↓ATC）。产生平末端的 DNA 可任意连接，但连接效率较粘性末端低。
3．限制酶产生非对称突出端
许多限制酶切割 DNA 产生非对称突出端。当识别序列为非对称序列时，切割的 DNA 产物的末端是不同的，如 BbvCⅠ ，它的识别切割位点如下。
CC↓TCAGC
GGAGT↑CG
有些限制酶识别简并序列，其识别的序列中有几种是非对称的。如 AccⅠ ，它的识别切割位点如下，其中 GTAGAC 和 GTCTAC 为非对称。
GT↓AT/CGAC
CATA/GC↑TG
有些限制酶识别间隔序列，间隔区域的序列是任意的，如 DraⅢ 和 EarⅠ
高中生物教学参考书上也介绍有。也就是说限制酶产生末端有三种，黏性末端是其中一种，还有平末端
如：高中生物教学参考上介绍了一种限制酶HaeⅢ（GG↓CC）识别序列为
-CCGG-
-GGCC-
切点为C↓G。
限制酶切之后为平齐末端:
-CC GG-
-GG CC-