Question

蛋白质沉淀有哪几种方法?哪些是可逆的沉淀反应

Answer 1

　蛋白质沉淀 蛋白质在溶液中的稳定性是有条件的、相对的.如果条件发生改变,破坏了蛋白质溶液的稳定性,蛋白质分子则聚集成大的颗粒沉淀出来.
　　蛋白质溶液的稳定性与质点大小、电荷和水化作用有关,只要破坏这些条件,蛋白质自然会从溶液中沉淀出.
　　沉淀蛋白质有以下方法：
　　1、盐析法
　　2、有机溶剂沉淀法
　　3、重金属盐沉淀法
　　4、生物碱试剂和某些酸（三氯醋酸,磺基水杨酸,硝酸等）沉淀法
　　5、加热变性沉淀法
　　蛋白质变性：蛋白质的天然构象遭到破坏导致其生物活性丧失的现象.蛋白质在受到光照、热、有机溶剂以及一些变性剂的作用时,次级键受到破坏,导致天然构象的破坏,使蛋白质的生物活性丧失.
　　蛋白质分子凝聚从溶液中析出的现象称为蛋白质沉淀（precipitation）,变性蛋白质一般易于沉淀,但也可不变性而使蛋白质沉淀,在一定条件下,变性的蛋白质也可不发生沉淀.
　　蛋白质所形成的亲水胶体颗粒具有两种稳定因素,即颗粒表面的水化层和电荷.若无外加条件,不致互相凝集.然而除掉这两个稳定因素（如调节溶液pH至等电点和加入脱水剂）蛋白质便容易凝集析出.
　　可以看出,如将蛋白质溶液pH调节到等电点,蛋白质分子呈等电状态,虽然分子间同性电荷相互排斥作用消失了.但是还有水化膜起保护作用,一般不致于发生凝聚作用,如果这时再加入某种脱水剂,除去蛋白质分子的水化膜,则蛋白质分子就会互相凝聚而析出沉淀；反之,若先使蛋白质脱水,然后再调节pH到等电点,也同样可使蛋白质沉淀析出.

Answer 2

楼主你好，你说的蛋白质的沉淀有两种，加轻金属盐（如氯化钠）之后会凝固，不过是可逆的，加足量的水后就变得澄清了。另一种是在加热，加入重金属盐（如醋酸铅），浓酸，或加入甲醛、乙醇等有机物之后会变性产生固态沉淀，这是不可逆的。

Answer 3

蛋白质可逆沉淀一般发生在盐析的时候,即在蛋白质溶液中加浓盐溶液,让蛋白质析出,这种情况下蛋白质的空间构象依然完整,复溶后蛋白依然具有生物学活性.蛋白质不可逆沉淀一般认为是蛋白质变性,即蛋白质在某些物理和化学因素作用下其特定的空间构象被破坏,从而导致其生物活性丧失.蛋白质可逆沉淀多用于提取纯化,例如利用盐析法从牛奶中制备酪蛋白.蛋白质不可逆沉淀可用于灭菌,消毒,例如医疗器械高温灭菌.